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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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草山残梦

新虫 (小有名气)

[求助] DNA纯化:向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后可以直接过柱子吗

DNA提取后纯化:向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后可以直接过柱子吗,会不会离心时DNA随TE溶液一起被离心下来而不被吸附到柱之上?
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
当然要加binding buffer。。
2楼2013-05-02 09:09:55
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renzhiq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-05-02 10:04:00
不可以向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后直接过柱子,你直接过是挂不上的。你如果非要挂可以向里面加入等倍体积的溶胶液(凝胶回收试剂盒),再挂柱子,洗脱就可以。祝实验顺利
3楼2013-05-02 09:13:30
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌

【答案】应助回帖


gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-05-02 10:04:35
当然不可以,如果这样,DNA都随着TE一起露出来了, 根本不会黏在柱子上啊。
我是胖虎,我是孩子王!
4楼2013-05-02 09:28:57
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nmhsd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
草山残梦(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 12:08:39
你的离心柱不是单独买的吧?试剂盒中给的离心柱都不会告诉你吸附DNA的pH值及盐浓度,所以你只能用它给的BindingBuffer,不可以随便上柱就指望能吸附上,洗脱同理。如果你单独买的吸附柱就另说了,看说明书呗。
5楼2013-05-02 10:18:56
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
草山残梦(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-02 12:08:50
柱子里面的硅胶膜在一定的条件下才比较容易吸附DNA。
6楼2013-05-02 10:24:11
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dafeizizhu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
草山残梦(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-02 12:08:58
酚氯仿抽提就很好使的,我一般都不用柱子的。试剂自己配,步骤按照分子克隆上来,效果很好。
7楼2013-05-02 10:47:10
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
纯化DNA就三部,第一是溶解,第二是结合,第三是洗脱!结合完了,要用漂洗液漂洗一下,去除杂质!
坚持,就像流星,即使知道最后的结果,也要勇敢的走到最后!
8楼2013-05-04 10:51:57
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定不行,原因是DNA能够溶解到那个里面。纯化DNA建议使用酒精沉淀法,很好用,简单方便,而且便宜
9楼2013-05-04 11:36:52
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