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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA纯化：向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后可以直接过柱子吗
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草山残梦

新虫 (小有名气)

[求助] DNA纯化：向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后可以直接过柱子吗

DNA提取后纯化：向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后可以直接过柱子吗，会不会离心时DNA随TE溶液一起被离心下来而不被吸附到柱之上？
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1楼 2013-05-02 08:50:59
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
当然要加binding buffer。。
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2楼2013-05-02 09:09:55
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renzhiq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-05-02 10:04:00
不可以向提取后的DNA沉淀中加入TE溶解后直接过柱子，你直接过是挂不上的。你如果非要挂可以向里面加入等倍体积的溶胶液（凝胶回收试剂盒），再挂柱子，洗脱就可以。祝实验顺利
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3楼2013-05-02 09:13:30
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zhaolf

木虫 (著名写手)

胖虎爱唱歌

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-05-02 10:04:35
当然不可以，如果这样，DNA都随着TE一起露出来了， 根本不会黏在柱子上啊。
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我是胖虎，我是孩子王！
4楼2013-05-02 09:28:57
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nmhsd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
草山残梦(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 12:08:39
你的离心柱不是单独买的吧？试剂盒中给的离心柱都不会告诉你吸附DNA的pH值及盐浓度，所以你只能用它给的BindingBuffer，不可以随便上柱就指望能吸附上，洗脱同理。如果你单独买的吸附柱就另说了，看说明书呗。
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5楼2013-05-02 10:18:56
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
草山残梦(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-02 12:08:50
柱子里面的硅胶膜在一定的条件下才比较容易吸附DNA。
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6楼2013-05-02 10:24:11
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dafeizizhu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
草山残梦(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-02 12:08:58
酚氯仿抽提就很好使的，我一般都不用柱子的。试剂自己配，步骤按照分子克隆上来，效果很好。
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7楼2013-05-02 10:47:10
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
纯化DNA就三部，第一是溶解，第二是结合，第三是洗脱！结合完了，要用漂洗液漂洗一下，去除杂质！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
8楼2013-05-04 10:51:57
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
肯定不行，原因是DNA能够溶解到那个里面。纯化DNA建议使用酒精沉淀法，很好用，简单方便，而且便宜
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9楼2013-05-04 11:36:52
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