24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1578  |  回复: 10

南海所老龚

新虫 (正式写手)

[求助] 线粒体DNA纯化前亮带单一,纯化后出现亮暗各一条带

各位大侠好,本人刚接触分子生物,今天实验过程中遇到一个问题,向各位大侠求助。
我现在做的是鱼类线粒体DNA全序列,在做克隆时,DNA纯化前亮单一且光亮,但是纯化后出现亮暗各一条带,长度相差1000bp左右(详见图片),不知道什么原因?(新手,等赚够金币了,再回馈社会


回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

silicare: 他做的是DNA,不是蛋白 2011-04-18 18:32:27
纯化后,原本在一起的蛋白分开了,所以两条带啊,不知道对不对,楼下继续。
2楼2011-04-18 17:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

silicare: 他做的是DNA,不是蛋白 2011-04-18 18:32:32
marker多大呢?
蛋白跑不到这个位置吧
3楼2011-04-18 17:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

genomelin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

克隆测序?那个是开环的载体吧?亮的是闭环的目的克隆?
4楼2011-04-18 18:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南海所老龚

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-04-18 17:32:26:
marker多大呢?
蛋白跑不到这个位置吧

做的是DNA,Marker为5000bp。
TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
5楼2011-04-19 08:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南海所老龚

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by genomelin at 2011-04-18 18:55:07:
克隆测序?那个是开环的载体吧?亮的是闭环的目的克隆?

对,克隆测序,这两张图片都是克隆前电泳结果,纯化后连接、转化、克隆。问题是纯化前带单一,纯化后怎么多出了一条带?
TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
6楼2011-04-19 08:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wazlf

银虫 (正式写手)

我也遇到你这样的问题,你还没说清楚呢!是检测模板,还是PCR 后检测?
失败不是成功之母,是贻误战机!
7楼2011-04-21 16:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shandongfmmu

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

大概明白你的意思,可能是纯化过程中使其形态变化,可能存在超螺旋,闭,开环等几种状态吧
快乐~~~~~~~
8楼2011-04-22 00:32:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南海所老龚

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wazlf at 2011-04-21 16:54:38:
我也遇到你这样的问题,你还没说清楚呢!是检测模板,还是PCR 后检测?

这两张照片分别是纯化前后的结果,按常规纯化前是一条带的话纯化后也应该是一条带,本人操作过程中十分小心,没有切到其他杂带。
TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
9楼2011-04-22 10:32:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学米

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by shandongfmmu at 2011-04-22 00:32:07:
大概明白你的意思,可能是纯化过程中使其形态变化,可能存在超螺旋,闭,开环等几种状态吧

我想请教你一个问题,你是用什么方法纯化的?
10楼2011-04-22 16:35:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 南海所老龚 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 0703调剂,一志愿天津大学319分 +11 haaaabcd 2026-04-05 11/550 2026-04-06 09:36 by jp9609
[考研] 一志愿西安交大材料学硕(英一数二)347,求调剂到高分子/材料相关专业 +8 zju51 2026-03-31 10/500 2026-04-06 09:03 by 醉翁wl
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +9 元元青青 2026-03-31 12/600 2026-04-05 21:03 by 学员8dgXkO
[考研] 307分材料专业求调剂 +7 Hll胡 2026-04-05 7/350 2026-04-05 18:47 by 无际的草原
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:02 by arrow8852
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考研] 323求调剂(计算机视觉和大模型项目经历) +3 chaoxiicy 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:33 by zhq0425
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 本科985,专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 286求调剂 +8 lim0922 2026-04-02 8/400 2026-04-03 20:19 by rzh123456
[考研] 282求调剂 +5 呼吸都是减肥 2026-03-31 5/250 2026-04-03 12:03 by 1753564080
[考研] 302求调剂 +9 zyx上岸! 2026-04-02 9/450 2026-04-02 23:07 by 马儿快快地跑
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
[考研] 材料340分调剂 +7 夏夜晚风_long 2026-04-02 9/450 2026-04-02 21:20 by dongzh2009
[考博] 材料工程专业硕士申博 +3 麟正宇 2026-03-30 3/150 2026-04-02 15:04 by greychen00
[考博] 26年申博 +3 staryer 2026-03-30 4/200 2026-04-01 23:21 by ai4pharm
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见