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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CTAB提取植物DNA，最后一步用无水乙醇洗涤可以吗？
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zhsp07

金虫 (小有名气)

[交流] CTAB提取植物DNA，最后一步用无水乙醇洗涤可以吗？

小白准备提取植物根部的内生菌总DNA，查了些文献，就根据其中一个的protocol做了，不过文中提DNA的时候，最后一步是用无水乙醇洗涤的，而我看中文文献，多事用70%乙醇洗涤的，所以就想问一下，70%乙醇和无水乙醇洗涤的话，差别大吗？无水乙醇会对DNA有影响吗？
说实话，我是愿意用无水乙醇，空气干燥的时候特别快，比较省事儿。
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1楼 2013-03-19 20:44:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 17:53:43
70%乙醇能提供比较好的除盐效果
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9楼2013-03-20 00:55:54
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dengyuanbao

木虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 17:53:17
楼主可以先用70%的洗两次，然后用无水乙醇脱水，这样干的快些，我一直都是这样的
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14楼2013-03-21 09:53:03
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普通回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
都是可以的，我都用过
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2楼2013-03-19 20:47:08
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zhsp07

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-03-19 20:47:08
都是可以的，我都用过

无水乙醇对DNA没有影响吗？因为实验室目前所用的都是70%的，而我觉得无水乙醇好用，所以就想改进一下。
也有人说之所以用70%的，是因为这样既可以除去异丙醇，又可以除去残留的盐，如何？
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3楼2013-03-19 20:54:58
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-19 22:26:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhsp07 at 2013-03-19 20:54:58
无水乙醇对DNA没有影响吗？因为实验室目前所用的都是70%的，而我觉得无水乙醇好用，所以就想改进一下。
也有人说之所以用70%的，是因为这样既可以除去异丙醇，又可以除去残留的盐，如何？...

用无水乙醇或者70%乙醇洗的确可以除去异丙醇，又可以除去残留的盐，DNA不溶于70%以上的无水乙醇，正是因为不溶所以才有70%以上乙醇洗，一般还是选用70%的比较好
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4楼2013-03-19 20:57:56
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zhsp07

金虫 (小有名气)
thanks
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5楼2013-03-19 21:17:27
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当下的距离

金虫 (正式写手)
★
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
差别不是很大
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8楼2013-03-20 00:35:07
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野草99688

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 17:53:49
2倍体积或2倍以上无水乙醇沉淀后，用70%乙醇洗涤一次即可！
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10楼2013-03-20 09:52:27
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119904386

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 17:53:56
我是先用70%洗两次，再无水冰乙醇洗两次。很干净
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11楼2013-03-20 11:18:04
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zhsp07

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 119904386 at 2013-03-20 11:18:04
我是先用70%洗两次，再无水冰乙醇洗两次。很干净

这样到是比较全备，不过这增加了两次的离心，每次都要配平，要是样品多的话，又得增加近一个小时了啊。
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12楼2013-03-20 12:52:40
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liujianmin68

木虫 (职业作家)
肯定可以
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13楼2013-03-21 00:03:57
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zhsp07

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 野草99688 at 2013-03-20 09:52:27
2倍体积或2倍以上无水乙醇沉淀后，用70%乙醇洗涤一次即可！

预冷的异丙醇比无水乙醇的沉淀效果好吧？
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15楼2013-03-21 13:41:17
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jishidong

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 17:54:04
我用无水乙醇试过，DNA容易降解。还是70%的好
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16楼2013-03-22 15:33:35
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zhsp07

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by jishidong at 2013-03-22 15:33:35
我用无水乙醇试过，DNA容易降解。还是70%的好

thanks
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17楼2013-03-23 17:17:40
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北极星※

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
影响不大，这么干过
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18楼2013-03-23 23:01:36
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我试过，没发现明显影响
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19楼2013-03-24 23:41:44
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wocause

银虫 (小有名气)
无水乙醇好！
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20楼2013-05-02 17:42:24
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xujin0525

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不行 如果异丙醇没有除干净就会在点样的时候上漂。
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21楼2013-05-05 00:19:35
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yingying15886楼
2013-03-19 21:17   回复  
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
haixiawu7楼
2013-03-19 23:55   回复  
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
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