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zhsp07

金虫 (小有名气)


[交流] CTAB提取植物DNA,最后一步用无水乙醇洗涤可以吗?

小白准备提取植物根部的内生菌总DNA,查了些文献,就根据其中一个的protocol做了,不过文中提DNA的时候,最后一步是用无水乙醇洗涤的,而我看中文文献,多事用70%乙醇洗涤的,所以就想问一下,70%乙醇和无水乙醇洗涤的话,差别大吗?无水乙醇会对DNA有影响吗?
说实话,我是愿意用无水乙醇,空气干燥的时候特别快,比较省事儿。
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zhsp07(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 17:53:43
70%乙醇能提供比较好的除盐效果
9楼2013-03-20 00:55:54
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dengyuanbao

木虫 (初入文坛)


★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 17:53:17
楼主可以先用70%的洗两次,然后用无水乙醇脱水,这样干的快些,我一直都是这样的
14楼2013-03-21 09:53:03
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普通回帖

zhsp07(金币+1): 谢谢参与
都是可以的,我都用过
2楼2013-03-19 20:47:08
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zhsp07

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-03-19 20:47:08
都是可以的,我都用过

无水乙醇对DNA没有影响吗?因为实验室目前所用的都是70%的,而我觉得无水乙醇好用,所以就想改进一下。
也有人说之所以用70%的,是因为这样既可以除去异丙醇,又可以除去残留的盐,如何?
3楼2013-03-19 20:54:58
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★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-19 22:26:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhsp07 at 2013-03-19 20:54:58
无水乙醇对DNA没有影响吗?因为实验室目前所用的都是70%的,而我觉得无水乙醇好用,所以就想改进一下。
也有人说之所以用70%的,是因为这样既可以除去异丙醇,又可以除去残留的盐,如何?...

用无水乙醇或者70%乙醇洗的确可以除去异丙醇,又可以除去残留的盐,DNA不溶于70%以上的无水乙醇,正是因为不溶所以才有70%以上乙醇洗,一般还是选用70%的比较好
4楼2013-03-19 20:57:56
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zhsp07

金虫 (小有名气)


5楼2013-03-19 21:17:27
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当下的距离

金虫 (正式写手)



zhsp07(金币+1): 谢谢参与
差别不是很大
8楼2013-03-20 00:35:07
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野草99688

银虫 (小有名气)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 17:53:49
2倍体积或2倍以上无水乙醇沉淀后,用70%乙醇洗涤一次即可!
10楼2013-03-20 09:52:27
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119904386

铁虫 (小有名气)


★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 17:53:56
我是先用70%洗两次,再无水冰乙醇洗两次。很干净
11楼2013-03-20 11:18:04
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zhsp07

金虫 (小有名气)


引用回帖:
11楼: Originally posted by 119904386 at 2013-03-20 11:18:04
我是先用70%洗两次,再无水冰乙醇洗两次。很干净

这样到是比较全备,不过这增加了两次的离心,每次都要配平,要是样品多的话,又得增加近一个小时了啊。
12楼2013-03-20 12:52:40
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liujianmin68

木虫 (职业作家)


肯定可以
13楼2013-03-21 00:03:57
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zhsp07

金虫 (小有名气)


引用回帖:
10楼: Originally posted by 野草99688 at 2013-03-20 09:52:27
2倍体积或2倍以上无水乙醇沉淀后,用70%乙醇洗涤一次即可!

预冷的异丙醇比无水乙醇的沉淀效果好吧?
15楼2013-03-21 13:41:17
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jishidong

铜虫 (初入文坛)


★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-02 17:54:04
我用无水乙醇试过,DNA容易降解。还是70%的好
16楼2013-03-22 15:33:35
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zhsp07

金虫 (小有名气)


引用回帖:
16楼: Originally posted by jishidong at 2013-03-22 15:33:35
我用无水乙醇试过,DNA容易降解。还是70%的好

thanks
17楼2013-03-23 17:17:40
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北极星※

金虫 (小有名气)



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影响不大,这么干过
18楼2013-03-23 23:01:36
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junior850621

铁杆木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我试过,没发现明显影响
19楼2013-03-24 23:41:44
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wocause

银虫 (小有名气)


无水乙醇好!
20楼2013-05-02 17:42:24
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xujin0525

铜虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不行 如果异丙醇没有除干净就会在点样的时候上漂。
21楼2013-05-05 00:19:35
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简单回复
2013-03-19 21:17   回复  
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
haixiawu7楼
2013-03-19 23:55   回复  
zhsp07(金币+1): 谢谢参与
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