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科大水货

铜虫 (小有名气)

[求助] 植物DNA提取问题

最近一直在提DNA,但是跑胶检测的结果很失望,在DNA条带(图中DNA条带很不清晰,请仔细看看)上方一直有弥散状的不规则条带,请各位大虾帮忙分析一下。现在快被折磨疯了!
注:因软件保存为TIF格式,不能直接上传,我转化成PDF格式了,不好意思啊,给大家添麻烦了,还望各位帮忙
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肃清华书

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-13 08:24:58
好恐怖的结果- -……估计是提DNA的时候不注意把DNA切断了,然后就会造成严重的拖尾现象
2楼2013-09-12 23:04:46
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科大水货

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 肃清华书 at 2013-09-12 23:04:46
好恐怖的结果- -……估计是提DNA的时候不注意把DNA切断了,然后就会造成严重的拖尾现象

谢谢回复,我剪一下枪头试试
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3楼2013-09-13 07:49:05
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dingxiuying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不客气的说,这是怎么提的呀?现在提取DNA的试剂盒有很多,国产的也很便宜,用kit提,又快又好。
我感觉不仅仅是DNA被切断造成的,每一步都得注意。
我自己的经验:做分子试验,结果总是不好的话,很伤人的,反复多次以后,自信心都没了,很受打击的。重要的还是要提高自己的心里承受能力。要坚持住啊!记住:害怕失败比失败更可怕。
所以建议,尽量使用试剂盒。
我喜欢默默地被你注视默默地注视着你,我喜欢深深地被你爱着深深地爱着你
4楼2013-09-13 09:41:07
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科大水货

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dingxiuying at 2013-09-13 09:41:07
不客气的说,这是怎么提的呀?现在提取DNA的试剂盒有很多,国产的也很便宜,用kit提,又快又好。
我感觉不仅仅是DNA被切断造成的,每一步都得注意。
我自己的经验:做分子试验,结果总是不好的话,很伤人的,反复 ...

我用的就是试剂盒,鼎国的。
还有,我用仪器检测的结果DNA浓度相差很大,有的50纳克每微升,而有的则三四百,相差近十倍。OD260/OD280结果也正常,在1.9左右,因为我没加RNA酶。OD230/OD260结果相差较大,有的大于2,这些正常,有的在1.5左右,结果偏小,但是不管仪器检测结果是否正常,跑胶的的图片都是那样,就是在DNA条带上方有弥散状的亮带。
另外,我用的叶子在负80度冰箱保存了几个月,这部分叶子提取的DNA浓度相差较大,但是我用新鲜叶子做了对照,并用仪器检测过了,用新鲜叶子提取的DNA浓度及OD260,280,230还有它们的比值都正常,但是跑胶检测的图片也是这样,无语啊
还望你能帮忙分析
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5楼2013-09-14 16:36:36
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萧晨轩007

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能是仪器的缘故,再一个,电压、电流设置的如何,在确定材料和步骤没出错的话,再看看这些方面,
既然至此,就要追求最好,
6楼2013-09-22 21:56:12
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

应该是电泳没跑好,且可能含较多蛋白,最后的带应该是RNA,不知你提什么组织的RNA,我师姐有用过天根的DNA提取试剂盒,效果不错的,老提成这样,若步骤没错,建议换下其他的方法,不要老做无必要的重复
思路决定出路。。。
7楼2013-09-22 22:35:27
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jiaxt13

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我是按试剂盒里边的说明来提的,没问题,而且很纯,浓度也高
我身本无处,心安是吾乡!
8楼2013-11-20 13:09:56
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