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科大水货

铜虫 (小有名气)

[求助] 植物DNA提取问题

最近一直在提DNA，但是跑胶检测的结果很失望，在DNA条带（图中DNA条带很不清晰，请仔细看看）上方一直有弥散状的不规则条带，请各位大虾帮忙分析一下。现在快被折磨疯了！
注：因软件保存为TIF格式，不能直接上传，我转化成PDF格式了，不好意思啊，给大家添麻烦了，还望各位帮忙
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    • 2013-09-12 21:53:11, 30.24 K

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1楼 2013-09-12 21:56:51
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科大水货

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dingxiuying at 2013-09-13 09:41:07
不客气的说，这是怎么提的呀？现在提取DNA的试剂盒有很多，国产的也很便宜，用kit提，又快又好。
我感觉不仅仅是DNA被切断造成的，每一步都得注意。
我自己的经验：做分子试验，结果总是不好的话，很伤人的，反复 ...

我用的就是试剂盒，鼎国的。
还有，我用仪器检测的结果DNA浓度相差很大，有的50纳克每微升，而有的则三四百，相差近十倍。OD260/OD280结果也正常，在1.9左右，因为我没加RNA酶。OD230/OD260结果相差较大，有的大于2，这些正常，有的在1.5左右，结果偏小，但是不管仪器检测结果是否正常，跑胶的的图片都是那样，就是在DNA条带上方有弥散状的亮带。
另外，我用的叶子在负80度冰箱保存了几个月，这部分叶子提取的DNA浓度相差较大，但是我用新鲜叶子做了对照，并用仪器检测过了，用新鲜叶子提取的DNA浓度及OD260，280，230还有它们的比值都正常，但是跑胶检测的图片也是这样，无语啊
还望你能帮忙分析
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5楼2013-09-14 16:36:36
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肃清华书

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-13 08:24:58
好恐怖的结果- -……估计是提DNA的时候不注意把DNA切断了，然后就会造成严重的拖尾现象
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2楼2013-09-12 23:04:46
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科大水货

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肃清华书 at 2013-09-12 23:04:46
好恐怖的结果- -……估计是提DNA的时候不注意把DNA切断了，然后就会造成严重的拖尾现象

谢谢回复，我剪一下枪头试试
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3楼2013-09-13 07:49:05
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dingxiuying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不客气的说，这是怎么提的呀？现在提取DNA的试剂盒有很多，国产的也很便宜，用kit提，又快又好。
我感觉不仅仅是DNA被切断造成的，每一步都得注意。
我自己的经验：做分子试验，结果总是不好的话，很伤人的，反复多次以后，自信心都没了，很受打击的。重要的还是要提高自己的心里承受能力。要坚持住啊！记住：害怕失败比失败更可怕。
所以建议，尽量使用试剂盒。
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我喜欢默默地被你注视默默地注视着你，我喜欢深深地被你爱着深深地爱着你
4楼2013-09-13 09:41:07
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