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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 无水乙醇沉淀DNA
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解瑶123

银虫 (正式写手)

[求助] 无水乙醇沉淀DNA

用无水乙醇提取DNA有什么技巧？为什么我提了两次，都什么都没有？
我的方法：两倍体积的无水乙醇，加入DNA，-20°C两个小时，离心10分钟，10000转。吸弃上清，适当晾干，加入少量的水溶解。
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动力泉

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1楼 2012-11-14 08:41:35
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动力泉

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
楼主应该在加乙醇之前可能已经将DNA丢失了，否则的话不可能提不出来的
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好好学习
15楼2012-12-01 09:22:47
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查看全部 15 个回答

710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 10:01:49
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-14 16:33:46
解瑶123: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-30 20:44:31
我们一般是用试剂盒提取DNA还是从粪便里提，效果都还好了，乙醇的量应该是够了，-20摄氏度两个小时有必要吗，
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may
2楼2012-11-14 08:49:58
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meldoyren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 09:59:58
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-14 16:33:57
理论上这个操作时没有问题的，除非你的样品在预处理的时候就出现了问题，另外可以把转速设为12000g。每个转子的转速和离心力大小不一样的。
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3楼2012-11-14 09:00:25
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 10:00:18
解瑶123: 金币+1 2012-11-14 10:01:37
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-14 16:34:12
这个样子看可能楼主你处理到这一步的时候就已经没有DNA了……因为无水乙醇这一步唯一可能出现问题的情况就是被DNA沉淀给吸走了……
楼主你如果抽的是基因组DNA的话，加入无水乙醇混匀之后，应该能看到有絮状的沉淀吧？如果没有，至少离心之后应该有沉淀
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4楼2012-11-14 09:41:51
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