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776142

金虫 (正式写手)


[交流] 质粒提取时加入乙醇dna不沉淀

在使用自己合成的DNA提取材料提取DNA的时候,用1M的NaCl进行的洗脱,然后用2倍体积的预冷的无水乙醇对DNA进行沉淀,发现没有沉淀,测混合液的紫外也是DNA仍在溶液中,不知道为什么,希望有懂的同学帮忙回答下
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776142

金虫 (正式写手)


引用回帖:
14楼: Originally posted by chlorella409 at 2013-06-04 14:26:10
溶液中盐太多了,电荷影响了DNA的沉淀,一般只加入1/10的PH5.2的乙酸钠

加乙醇就是为了除盐,额外加了乙酸钠,能沉淀下来,谢谢
16楼2013-06-06 08:08:49
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gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)


祝福祝福祝福祝福祝福祝福!
2楼2013-06-01 19:25:49
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)


★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
776142: 金币+2 2013-06-01 21:16:07
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-01 21:30:55
加入1M的NaC和2倍体积的预冷的无水乙醇,要颠倒混匀,-20度静止20min,高速离心,就可沉淀DNA
3楼2013-06-01 19:57:46
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★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
776142: 金币+2 2013-06-01 21:16:01
776142: 金币+2 2013-06-02 16:02:31
你用乙醇处理后有离心吗?没离心的话DNA自己沉不下来的哦。一般用12,000转离心10分钟。
4楼2013-06-01 20:38:02
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