应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序结果，why?
101/1返回列表
查看: 1447  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] 测序结果，why? 已有6人参与

请教下前辈:
我送的克隆菌液去测序，明明是挑单菌落摇菌的，可有几个样品返回说是非单克隆，测序峰有套叠，不明白，为什么是这样，请指教下问题出哪了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-03 12:35:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wshi85

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-03 20:18:18
你应该上传你的测序峰图！这个无外乎两种情况。第一你挑菌，占到了其他的菌，挑菌时只需要沾到菌落就行，范围不要挑的太大！另一个看测序那边怎么处理你的菌液的，是直接提，还是第二次接菌提质粒测序？
赞一下 回复此楼
很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！
2楼2014-10-03 12:55:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-03 20:18:26
污染的可能性比较大，也就是有杂菌进入
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-10-03 16:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-03 20:18:32
出现套峰，一个可能是测序公司的问题，第二就是你本身样品的问题，不是单克隆。把你的样品送别家公司测个序就好了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
4楼2014-10-03 19:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wshi85

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-10-03 19:15:06
出现套峰，一个可能是测序公司的问题，第二就是你本身样品的问题，不是单克隆。把你的样品送别家公司测个序就好了

其实找这个问题前，直接看峰图就行！没必要马上送其他公司！
赞一下 回复此楼
很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！
5楼2014-10-03 23:04:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
污染或者测序的引物特异性差，或者就是你的质粒上有两组基因
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
6楼2014-10-04 01:44:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wshi85 at 2014-10-03 23:04:07
其实找这个问题前，直接看峰图就行！没必要马上送其他公司！...

是的嘛？请教下如何从峰图上直接看是测序的问题还是样品本身的问题

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
7楼2014-10-04 06:54:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wshi85

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-10-04 06:54:01
是的嘛？请教下如何从峰图上直接看是测序的问题还是样品本身的问题
...

这不是一两句话说的清的，你测序测得多了就知道了！
赞一下 回复此楼
很久没在虫虫上漂游了，觉得回归虫虫！
8楼2014-10-04 18:08:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未婚

金虫 (正式写手)

分子小生

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jkamm(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-04 21:58:38
我也出现了这样的问题，你是不是用的单向测序啊？
我送去了3个样进行双向测序，返回来6个结果，3个是错误的，1个是你说的套峰，另外两个是正确的测序结果。究其原因是单向测序时引物不好，或者正反向在NCBI上就是弄反了的，我的就是这样，反而反向测序像其他测序结果的正向测序结果一样漂亮，我推断为NCBI上的序列是正反向弄错了（个人之见啊，请多指教）。再送一次吧，我是提了质粒后直接测序的，双向要实在些，推荐双向测通！ 、

望多多交流！
赞一下 回复此楼
You can't depend on luck, so you had better focus on the others!
9楼2014-10-04 21:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gayy1990602

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你在划线挑菌送测序噻，，，，，再看看，有可能测序公司没有弄好
赞一下 回复此楼
10楼2014-10-05 10:08:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jkamm 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +3 西山十月 2026-08-09 4/200 2026-08-09 22:38 by 西山十月
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭