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jaiminzhang

新虫 (小有名气)

[求助] 测序结果显示多了一个碱基,峰图上正常,请问什么原因?谢谢

克隆一个1700BP的基因,菌液抽质粒,测序,之前质粒PCR,双酶切都是对的,可是测序后,多了一个碱基,目的基因碱基是CCCCCC,测序结果是CCCCCCC,和峰图上显示的不一致,这可能是什么原因?谢谢

峰图
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幽绪西流

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-10-11 09:28:55
测序结果图不咋地,基本上是测序的问题 ,图太丑,基本就是5个C。不放心的画重测
2楼2011-10-10 22:20:07
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助!good! 2011-10-11 09:29:25
应该可以理解,连续相同的碱基,测序信号会出现干扰,漏读和多读一个碱基是正常的。基因应该没有问题。
Thank-you,so-blue.
3楼2011-10-11 08:39:17
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
4楼2011-10-11 10:00:38
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

都已经测到880了,出错一个连续的碱基实属正常啊。
5楼2011-10-11 11:21:50
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个应该是测序问题,你可不用理会,直接做表达看效果,效果才是硬道理
6楼2011-10-11 11:24:26
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baihezi_1

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

峰图不准确的位置已经在880bp以后了,一般800bp后的峰图就不可信了。你的片段总共1700bp,建议你反向测序就可以得到全长序列。
7楼2011-10-11 17:41:07
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带刀猎人

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2011-10-11 08:39:17:
应该可以理解,连续相同的碱基,测序信号会出现干扰,漏读和多读一个碱基是正常的。基因应该没有问题。

学习了,谢谢!
8楼2011-10-11 21:51:05
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lixc2009

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2367402楼: Originally posted by jaiminzhang at 2011-10-10 21:43:20
克隆一个1700BP的基因,菌液抽质粒,测序,之前质粒PCR,双酶切都是对的,可是测序后,多了一个碱基,目的基因碱基是CCCCCC,测序结果是CCCCCCC,和峰图上显示的不一致,这可能是什么原因?谢谢
f4/87/1423031_13182 ...

这图太丑了,基本都没有尖锐的峰啊!!
广州珈源--肿瘤检测、安博抗体,欢迎您!!
9楼2012-08-03 15:16:35
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