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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序结果显示多了一个碱基，峰图上正常，请问什么原因？谢谢
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jaiminzhang

新虫 (小有名气)

[求助] 测序结果显示多了一个碱基，峰图上正常，请问什么原因？谢谢

克隆一个1700BP的基因，菌液抽质粒，测序，之前质粒PCR，双酶切都是对的，可是测序后，多了一个碱基，目的基因碱基是CCCCCC，测序结果是CCCCCCC,和峰图上显示的不一致，这可能是什么原因？谢谢

峰图
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1楼2011-10-10 21:43:20
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幽绪西流

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-11 09:28:55
测序结果图不咋地，基本上是测序的问题 ，图太丑，基本就是5个C。不放心的画重测
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2楼2011-10-10 22:20:07
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！good！ 2011-10-11 09:29:25
应该可以理解，连续相同的碱基，测序信号会出现干扰，漏读和多读一个碱基是正常的。基因应该没有问题。
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Thank-you，so-blue.
3楼2011-10-11 08:39:17
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
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4楼2011-10-11 10:00:38
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

都已经测到880了，出错一个连续的碱基实属正常啊。
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5楼2011-10-11 11:21:50
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个应该是测序问题，你可不用理会，直接做表达看效果，效果才是硬道理
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6楼2011-10-11 11:24:26
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baihezi_1

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

峰图不准确的位置已经在880bp以后了，一般800bp后的峰图就不可信了。你的片段总共1700bp，建议你反向测序就可以得到全长序列。
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7楼2011-10-11 17:41:07
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带刀猎人

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2011-10-11 08:39:17:
应该可以理解，连续相同的碱基，测序信号会出现干扰，漏读和多读一个碱基是正常的。基因应该没有问题。

学习了，谢谢！
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8楼2011-10-11 21:51:05
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lixc2009

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2367402楼: Originally posted by jaiminzhang at 2011-10-10 21:43:20
克隆一个1700BP的基因，菌液抽质粒，测序，之前质粒PCR，双酶切都是对的，可是测序后，多了一个碱基，目的基因碱基是CCCCCC，测序结果是CCCCCCC,和峰图上显示的不一致，这可能是什么原因？谢谢
f4/87/1423031_13182 ...

这图太丑了，基本都没有尖锐的峰啊！！
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9楼2012-08-03 15:16:35
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