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请教一个关于测序峰图的问题
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俺有一个测序峰图,双峰的,不知道是什么原因造成的,下面这个图是上游测的,质粒,在不到100bp的地方就出现了双峰,然后后面就变成了下面那个图的样子,在后面还出现了同样双峰的情况,下游说是没有信号,不知道到底是怎么回事,烦请高手指点一二,多谢! |
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空谷幽风
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
wawjp(金币+2): 恩,多谢多谢! 2011-07-22 11:13:47
西瓜(金币+5, EPI+1): 专业的专家 2011-07-22 11:50:07
wawjp(金币+2): 恩,多谢多谢! 2011-07-22 11:13:47
西瓜(金币+5, EPI+1): 专业的专家 2011-07-22 11:50:07
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出现套峰,一般都是因为模板不纯引起的,这是由于在接种时没有挑单菌落导致的,当两个以上的正常的克隆(插入片段方向相反),或正常克隆与空载体混在一起,而通过酶切和PCR鉴定很难看出异常,尤其在T-A克隆时经常碰到。 解决办法:重新涂平板挑单菌落测序。需要注意的是,重新进行PCR反应或者酶切鉴定仅能证明该克隆含有插入片段,并不足以证明模板的单一。 |
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2楼2011-07-22 10:52:59
loveskyzhou
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3楼2011-07-25 10:06:49
空谷幽风
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4楼2011-07-25 10:41:01
起沃尔特与
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5楼2013-04-06 18:15:00
wuxiyan
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loveskyzhou