24小时热门版块排行榜    

查看: 2149  |  回复: 5
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

wawjp

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一个关于测序峰图的问题

俺有一个测序峰图,双峰的,不知道是什么原因造成的,下面这个图是上游测的,质粒,在不到100bp的地方就出现了双峰,然后后面就变成了下面那个图的样子,在后面还出现了同样双峰的情况,下游说是没有信号,不知道到底是怎么回事,烦请高手指点一二,多谢!


回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wawjp(金币+2): 恩,多谢多谢! 2011-07-22 11:13:47
西瓜(金币+5, EPI+1): 专业的专家 2011-07-22 11:50:07
出现套峰,一般都是因为模板不纯引起的,这是由于在接种时没有挑单菌落导致的,当两个以上的正常的克隆(插入片段方向相反),或正常克隆与空载体混在一起,而通过酶切和PCR鉴定很难看出异常,尤其在T-A克隆时经常碰到。
解决办法:重新涂平板挑单菌落测序。需要注意的是,重新进行PCR反应或者酶切鉴定仅能证明该克隆含有插入片段,并不足以证明模板的单一。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2011-07-22 10:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by 空谷幽风 at 2011-07-22 10:52:59:
出现套峰,一般都是因为模板不纯引起的,这是由于在接种时没有挑单菌落导致的,当两个以上的正常的克隆(插入片段方向相反),或正常克隆与空载体混在一起,而通过酶切和PCR鉴定很难看出异常,尤其在T-A克隆时经常 ...

你好,我是路过的菜。  能不能告诉下这个峰图是咋看的?  我看并不是一个碱基对应一个峰啊??
我会绕一个圈,走回到实验室
3楼2011-07-25 10:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

正常的测序结果都是一个峰代表一个碱基,并且两个峰之间是很独立的,这个峰图由于模板不纯而导致出现了套峰,结果是不可信的
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-25 10:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

起沃尔特与

木虫 (小有名气)

会不会是缺失突变?
远见胜于经验。
5楼2013-04-06 18:15:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuxiyan

铁虫 (初入文坛)

双峰可能是双模版吧
我要成功
6楼2015-01-15 14:23:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wawjp 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 6/300 2026-08-25 00:11 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见