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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提RNA浓度低怎么办！紧急求助
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Doc.tara

新虫 (初入文坛)

[求助] 提RNA浓度低怎么办！紧急求助 已有3人参与

RT
我用的的是TAKARA的试剂盒，提取的是原代培养的B cell，最终浓度一般都是10左右，是不是太低了！连峰都没有，
是哪里出了问题么？求各位大神多提提可能性或者解决方法啊  简直要疯了

然后有几个可能性，
1，可能B cell本来的RNA浓度就比较低，所以可能就达不到该有的水平，
2，因为是新手，所以是不是RNA降解的也会比较多

可是怎么也不能这么低啊

多谢多谢！！！
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我要一步一步的往上爬
1楼 2014-09-26 21:11:43
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Doc.tara

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 陌路行客 at 2014-09-27 08:56:54
这个要看你细胞的量了，实在不行，做个对照，同样量的细胞系一起提RNA，如果浓度相差很大的话，可能就是B细胞本身的原因了。不过这么低的浓度也可以反转做QRT的，哈哈，不过要用特殊一点的试剂盒，

我的初始细胞量一般是10的6次方左右，试剂盒用的还是miniBEST的试剂盒，本来推荐的初始细胞量就是≦5x10的6次方
并且我还是在超静台内提取的  他们很多都是在外面提的也没什么问题啊……
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我要一步一步的往上爬
5楼2014-10-13 21:36:54
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陌路行客

金虫 (小有名气)
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-27 10:47:46
这个要看你细胞的量了，实在不行，做个对照，同样量的细胞系一起提RNA，如果浓度相差很大的话，可能就是B细胞本身的原因了。不过这么低的浓度也可以反转做QRT的，哈哈，不过要用特殊一点的试剂盒，
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人生中的悲剧太多了
2楼2014-09-27 08:56:54
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zhqingfang

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-27 10:47:56
我做的也是TAKARA的试剂盒，提取的是人羊膜间充质干细胞，但我提的浓度最小也是70以上，应该是降解了才那么低的，那么低的浓度逆转录都没法做哦。整个操作过程中特别注意戴上无酶手套、口罩等以及操作的规范性。所用的所有仪器均为去酶的，祝你顺利
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实验忙碌中
3楼2014-09-27 09:11:20
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bwangel

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
降解可以看出来的，浓度低后期实验不好
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4楼2014-09-27 09:15:39
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