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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌OD值总是在0.2左右，浓度上不去怎么办？？？
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sybyl

木虫 (小有名气)

[求助] 细菌OD值总是在0.2左右，浓度上不去怎么办？？？

我用LB培养基培养（大肠、金葡、绿脓、等菌）原代细菌，划板生长缓慢，抑菌圈不明显，侧OD值总是在0.2一下，且从不同时间点取样侧OD值都没有吸收峰出现，是怎么回事？就算浓度低也应该有吸收峰啊？？？
PS：菌株是从血平板转过来的，在那上面菌落很大，生长速度也快
不过我以前养的菌不是原代的（也是这几种菌），就在LB生长良好，摇床10个小时浓度就很大了
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1楼 2013-01-20 17:46:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sybyl

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-01-20 18:02:16
我们这用摇床都是过夜的，你这个10个小时是怎么搞出来的呀？是不是晚上弄得很晚呀？做绿脓杆菌小罐发酵6小时基本就涨到OD值2.5（不稀释）啦，我配的LB在520nm处的OD是0.15，有加消泡剂的，你那0.2是不是没接菌 ...

不会吧  我的LB在600nm OD值0.07

我现在是在14h、15h、16h分别测OD了啊，发现没有增长啊

接菌之后摇床过夜，菌液明显浑浊了嘛，但是OD值就是很低，而且全波长扫描曲线是双曲线那样的   没有波峰  一直递减

从96孔板里的菌液划板照样能长菌啊
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3楼2013-01-20 19:41:30
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匿名

用户注销 (知名作家)
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2013-01-20 18:17:37
sybyl: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-20 21:53:39
本帖仅楼主可见
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2楼2013-01-20 18:02:16
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sybyl

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-01-20 18:02:16
我们这用摇床都是过夜的，你这个10个小时是怎么搞出来的呀？是不是晚上弄得很晚呀？做绿脓杆菌小罐发酵6小时基本就涨到OD值2.5（不稀释）啦，我配的LB在520nm处的OD是0.15，有加消泡剂的，你那0.2是不是没接菌 ...

还有我用的是96孔板，每孔加100ul菌液  在酶标仪上测得
操作步骤没问题的
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4楼2013-01-20 19:57:03
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llyy2221

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sybyl: 金币+2, ★有帮助 2013-01-20 21:53:55
检查环境 看看是不是有噬菌体污染的现象  大肠最怕噬菌体了
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5楼2013-01-20 21:07:22
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sybyl

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by llyy2221 at 2013-01-20 21:07:22
检查环境 看看是不是有噬菌体污染的现象  大肠最怕噬菌体了

应该不会的，我养了6种菌，不会都污染吧，，主要还是全波长扫描没有吸收峰出现，这个问题不知道怎么回事，就算菌密度不够，也会有个吸收峰吧...
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6楼2013-01-20 21:53:08
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xiejinhui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
sybyl: 金币+1, ★有帮助 2013-01-21 13:13:41
看来你测的时候有点不足。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-01-21 08:02:43
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sybyl

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiejinhui at 2013-01-21 08:02:43
看来你测的时候有点不足。

问题出在哪里啊

有菌没有吸收峰是怎么回事
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8楼2013-01-21 13:13:25
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zylx

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
sybyl: 金币+2 2013-04-04 10:19:30
原因可能有几方面：1浓度问题，太浓了就测不到了！2.长过了，菌体自溶，你可以先稀释看看！
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9楼2013-03-18 20:31:09
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sybyl: 金币+3 2013-04-04 10:19:48
楼主，你要注意，细菌不能传太多代，会影响生长的。我们一般是活化后，再传一代。长得很快的啊，18h就很多了。
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悲伤着你的悲伤，幸福着你的幸福
10楼2013-03-19 09:19:12
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