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Doc.tara

新虫 (初入文坛)

[求助] 提RNA浓度低怎么办!紧急求助 已有3人参与

RT
我用的的是TAKARA的试剂盒,提取的是原代培养的B cell,最终浓度一般都是10左右,是不是太低了!连峰都没有,
是哪里出了问题么?求各位大神多提提可能性或者解决方法啊  简直要疯了

然后有几个可能性,
1,可能B cell本来的RNA浓度就比较低,所以可能就达不到该有的水平,
2,因为是新手,所以是不是RNA降解的也会比较多

可是怎么也不能这么低啊

多谢多谢!!!
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陌路行客

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 10:47:46
这个要看你细胞的量了,实在不行,做个对照,同样量的细胞系一起提RNA,如果浓度相差很大的话,可能就是B细胞本身的原因了。不过这么低的浓度也可以反转做QRT的,哈哈,不过要用特殊一点的试剂盒,
人生中的悲剧太多了
2楼2014-09-27 08:56:54
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zhqingfang

金虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-27 10:47:56
我做的也是TAKARA的试剂盒,提取的是人羊膜间充质干细胞,但我提的浓度最小也是70以上,应该是降解了才那么低的,那么低的浓度逆转录都没法做哦。整个操作过程中特别注意戴上无酶手套、口罩等以及操作的规范性。所用的所有仪器均为去酶的,祝你顺利
实验忙碌中
3楼2014-09-27 09:11:20
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bwangel

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
降解可以看出来的,浓度低后期实验不好
4楼2014-09-27 09:15:39
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Doc.tara

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 陌路行客 at 2014-09-27 08:56:54
这个要看你细胞的量了,实在不行,做个对照,同样量的细胞系一起提RNA,如果浓度相差很大的话,可能就是B细胞本身的原因了。不过这么低的浓度也可以反转做QRT的,哈哈,不过要用特殊一点的试剂盒,

我的初始细胞量一般是10的6次方左右,试剂盒用的还是miniBEST的试剂盒,本来推荐的初始细胞量就是≦5x10的6次方
并且我还是在超静台内提取的  他们很多都是在外面提的也没什么问题啊……
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5楼2014-10-13 21:36:54
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