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用LB培养BL21(DE3)菌体总是死亡，求助！ 已有8人参与
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我最近做原核表达，用BL21(DE3)，质粒PET32，我用保存的菌株划板、挑斑活化，用LB在37℃加氨苄培养，刚开始菌体扩增，可是过两个小时后总是死亡（由之前的乳黄状变成带渣滓的清澈状）。我没有加IPTG，只是纯粹扩增，最近总是这样。 同时做的其他蛋白都这样，而且之前做的挺好，说明不是毒蛋白的原因，而且活化的菌株应该没问题，因为刚开始我小量诱导很正常，四度保存过几天慢慢就不好了。有时候刚刚挑的斑也会摇不起来。LB我们都不调pH，之前做的挺好，我换了各种公司的去离子水，应该排除水质问题。各位大虾有没有遇到过类似情况的。 |
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