24小时热门版块排行榜    

查看: 2182  |  回复: 6

crazymouse66

金虫 (正式写手)

[求助] 求助,AMP-LB培养基

昨天做的质粒连接(5μL),导入感受态细胞后加800μL的AMP-LB液体培养基摇3h,然后涂AMP-LB培养基,我涂平板时用的是200μL的体系。以前都没出现过这种情况,这次平板上出现了成片的菌苔。这是怎么回事?
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : P6190026.JPG
  • 2012-06-19 10:43:58, 1.25 M
  • 附件 2 : P6190027.JPG
  • 2012-06-19 10:44:00, 1.19 M

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

31569218

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crazymouse66: 金币+2, 有帮助 2012-06-19 22:14:45
额,平板没划匀的过吧。。。
爱之深痛之切
2楼2012-06-19 11:33:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crazymouse66

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 31569218 at 2012-06-19 11:33:58
额,平板没划匀的过吧。。。

你好   以前我也是这样涂平板的,但是没有出现过这种状况,我在想是不是我的AMP失效了才导致杂菌感染,所以现在我把没用过的AMP平板都放在37℃下过夜,如果长菌的话那就是平板问题了。
3楼2012-06-19 12:45:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hchh2002

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crazymouse66: 金币+2, 有帮助 2012-06-19 22:15:04
可以做个不带抗性的菌涂在板子上,做个对照试试。感觉像是Amp失效了。
4楼2012-06-19 20:49:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小love肖

铜虫 (初入文坛)

质粒转化时,涂板只需要30ul或50ul就足够了,而且导入感受态细胞后应加入不带抗性的LB液体培养基摇,不超过1h
5楼2012-12-18 10:21:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 小love肖 at 2012-12-18 10:21:03
质粒转化时,涂板只需要30ul或50ul就足够了,而且导入感受态细胞后应加入不带抗性的LB液体培养基摇,不超过1h

为什么摇瓶的时候不加抗生素呢???新手求解啊
6楼2013-05-13 11:23:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20083630zhan

木虫 (正式写手)

转化结束之后,20ul的转化也先加入180ul的不含AMP的LB培养基,150rpm/min,培养45min左右,然后再涂到AMP+LB的抗性平板上面,一开始不加抗生素的原因是:刚刚导入的质粒在E.coli中还没有表达,如果此时加入抗生素的话,对菌体生长不利。
7楼2013-05-14 09:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 crazymouse66 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 283求调剂,材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 一志愿河海大学085900土木水利专硕279求调剂不挑专业 +4 SunWwWwWw 2026-03-10 8/400 2026-03-13 02:23 by SunWwWwWw
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见