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nutplay

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】LB平板的问题 已有17人参与

终于找到克隆不出来的原因,原来是LB平板出了问题。
之前一直用自己的平板,上面几乎什么都不长,太郁闷了。
后来借个别人的加了氨苄的LB板,用别人构建好的质粒,只做转化这一步,发现在别人的平板上长得很好,在我的平板上还是什么都不长。看到这个结果都要哭了,以前都以为是感受态或是载体的问题,换了又换。结果实验怎么都做不出来。谁能想到是平板出了问题啊~~~
另外:我的平板跟别人的比,偏黄而且很透明。别人的板偏乳白,而且不是很透明的状态。我的板在37°的时候,放一段时间,有时候还会出现很多小水泡。
哪位大侠知道到底是什么原因啊,哪里出了问题啊~~~
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
,真是啥样的问题都有啊。很诡异,不知道是不是同一瓶试剂配出来的LB。

发现问题就好了,实在找不到最终的原因也有处理的办法了:丢掉你的平板,用别人的。,省的伤肝伤肺。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-29 10:13:33
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nkk12345

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还能有什么问题,你用的试剂是什么产品,哪生产的,还有你Amp的浓度是多少,你的蛋白胨,酵母粉,NacL是不是10,5,10,还能是什么原因,呵呵
3楼2010-12-29 10:18:09
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主


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做实验的时候,真是各种神奇的事情都可能发生
千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
4楼2010-12-29 10:21:06
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nutplay

新虫 (初入文坛)

酵母提取物和胰蛋白胨的广东环凯的,氯化钠和琼脂是天津的。Amp的终浓度是50ug/ml。之前就是觉得一个平板怎么会有问题呢。所以想到的都是其他那些东西。谁知道就是这么对比了,发现问题就在平板上,一个离心管出来的东西,人家的就是长满了,我的板上就是啥都不长。悲催~~~
5楼2010-12-29 10:26:51
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果可以,酵母粉和蛋白胨还是用OXOID的吧。平板放时间长有水是很正常的,你在封口之前,没有把水汽全放尽,所以放在冰箱里会有水的!
I am not a hero , but I served with heroes!
6楼2010-12-29 11:03:47
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主

引用回帖:
Originally posted by nutplay at 2010-12-29 10:26:51:
酵母提取物和胰蛋白胨的广东环凯的,氯化钠和琼脂是天津的。Amp的终浓度是50ug/ml。之前就是觉得一个平板怎么会有问题呢。所以想到的都是其他那些东西。谁知道就是这么对比了,发现问题就在平板上,一个离心管出来 ...

胰蛋白胨跟酵母粉,现在一般都是用OXOID的了,也不贵,两瓶加起来才500多点吧
千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
7楼2010-12-29 17:43:20
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wangying052

新虫 (初入文坛)


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我们蛋白胨,酵母粉用BBI的,从上海生工买的,效果不错,NaCl就没那么严格了,天津永大的或者北方天医的都行,琼脂用的博大泰克的,但博大泰克已经倒了。。。
8楼2010-12-29 21:33:00
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zhangtao0502

木虫 (小有名气)


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颜色不对可能是PH的原因,存放应该4度吧!
9楼2010-12-29 22:05:08
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看你的情况基本上是抗生素出问题了,用别人的抗生素,别人的使用量再配一次。
生命不息,探索不止。
10楼2010-12-29 22:19:35
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