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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】LB平板的问题
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nutplay

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】LB平板的问题 已有17人参与

终于找到克隆不出来的原因，原来是LB平板出了问题。
之前一直用自己的平板，上面几乎什么都不长，太郁闷了。
后来借个别人的加了氨苄的LB板，用别人构建好的质粒，只做转化这一步，发现在别人的平板上长得很好，在我的平板上还是什么都不长。看到这个结果都要哭了，以前都以为是感受态或是载体的问题，换了又换。结果实验怎么都做不出来。谁能想到是平板出了问题啊~~~
另外：我的平板跟别人的比，偏黄而且很透明。别人的板偏乳白，而且不是很透明的状态。我的板在37°的时候，放一段时间，有时候还会出现很多小水泡。
哪位大侠知道到底是什么原因啊，哪里出了问题啊~~~
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1楼 2010-12-29 10:06:29
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
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，真是啥样的问题都有啊。很诡异，不知道是不是同一瓶试剂配出来的LB。

发现问题就好了，实在找不到最终的原因也有处理的办法了：丢掉你的平板，用别人的。，省的伤肝伤肺。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-29 10:13:33
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nkk12345

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还能有什么问题，你用的试剂是什么产品，哪生产的，还有你Amp的浓度是多少，你的蛋白胨，酵母粉，NacL是不是10，5，10，还能是什么原因，呵呵
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3楼2010-12-29 10:18:09
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
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做实验的时候，真是各种神奇的事情都可能发生
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
4楼2010-12-29 10:21:06
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nutplay

新虫 (初入文坛)
酵母提取物和胰蛋白胨的广东环凯的，氯化钠和琼脂是天津的。Amp的终浓度是50ug/ml。之前就是觉得一个平板怎么会有问题呢。所以想到的都是其他那些东西。谁知道就是这么对比了，发现问题就在平板上，一个离心管出来的东西，人家的就是长满了，我的板上就是啥都不长。悲催~~~
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5楼2010-12-29 10:26:51
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
★
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如果可以，酵母粉和蛋白胨还是用OXOID的吧。平板放时间长有水是很正常的，你在封口之前，没有把水汽全放尽，所以放在冰箱里会有水的！
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I am not a hero , but I served with heroes！
6楼2010-12-29 11:03:47
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by nutplay at 2010-12-29 10:26:51:
酵母提取物和胰蛋白胨的广东环凯的，氯化钠和琼脂是天津的。Amp的终浓度是50ug/ml。之前就是觉得一个平板怎么会有问题呢。所以想到的都是其他那些东西。谁知道就是这么对比了，发现问题就在平板上，一个离心管出来 ...

胰蛋白胨跟酵母粉，现在一般都是用OXOID的了，也不贵，两瓶加起来才500多点吧
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
7楼2010-12-29 17:43:20
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wangying052

新虫 (初入文坛)
★
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我们蛋白胨，酵母粉用BBI的，从上海生工买的，效果不错，NaCl就没那么严格了，天津永大的或者北方天医的都行，琼脂用的博大泰克的，但博大泰克已经倒了。。。
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8楼2010-12-29 21:33:00
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zhangtao0502

木虫 (小有名气)
★
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颜色不对可能是PH的原因，存放应该4度吧！
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9楼2010-12-29 22:05:08
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
★
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看你的情况基本上是抗生素出问题了，用别人的抗生素，别人的使用量再配一次。
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生命不息，探索不止。
10楼2010-12-29 22:19:35
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