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csjiang1123

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌感受态污染问题已有15人参与

我最近做了一批大肠杆菌感受态DH5a ,在以前涂的板上挑了三个单菌落,液体LB培养.三管菌种,一个加KANA,一个加AMP,最后一个什么抗生素都没加,结果过夜后,只有不加抗生素的小管长出菌了。就是就用该菌做感受态,可做好后涂kana ,和amp的平板,amp平板不长菌。而kana的平板长菌,试了三次都是一样,加大kana浓度也无效,在将感受态放入加了kana的LB中培养了,三天都不长菌,哪位仁兄帮忙说说这是怎么回事,我做的感受态是污染了吗?
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QQS1988

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不好意思!我不懂。来顶贴来了。
2楼2010-05-17 23:13:36
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-18 06:20:03
感觉楼主说的比较混乱!
你中间说涂的是氨苄和卡纳的板子,氨苄的不长,卡纳的长了,后来又将同一个感受态接种到卡纳的LB中又不长了,我怀疑是不是你在中间涂卡纳的板子的时候染菌了啊?
验证你做的感受态是不是污染了的最好方法就是用一下试试!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2010-05-17 23:14:12
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小白兄

金虫 (小有名气)


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kana平板是什么时候的?会不会你的kana抗性平板失效了?
时光如流水,匆匆而过。
4楼2010-05-17 23:16:57
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-18 06:20:31
我感觉楼主无菌操作过程中污染的可能性最大,我也建议做好感受态后你可以拿一个质粒转化试试,比如pUC18完整质粒!如果转化效果没问题,我想可以用这批感受态!别弄得那么复杂!!!
大家共同交流、共同提高!!!
5楼2010-05-17 23:19:17
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xiangfeng

铁杆木虫 (职业作家)

永远中国心

不懂,支持一下
心宽世界大,高效工作!
6楼2010-05-18 07:09:33
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jasco

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
实在不放心,这批感受态你就专门转化amp抗性的用掉,
7楼2010-05-18 09:02:43
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lstt09nk:交流贴请勿纯表~~感谢配合~~ 2010-05-18 13:37:05
8楼2010-05-18 09:11:29
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yinsongna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
制备过程中污染了
9楼2010-05-18 09:20:25
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liyong1981

金虫 (正式写手)


问的都不清楚~~~
10楼2010-05-18 12:58:52
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