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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌感受态污染问题
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csjiang1123

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌感受态污染问题 已有15人参与

我最近做了一批大肠杆菌感受态DH5a ，在以前涂的板上挑了三个单菌落，液体LB培养.三管菌种，一个加KANA，一个加AMP，最后一个什么抗生素都没加，结果过夜后，只有不加抗生素的小管长出菌了。就是就用该菌做感受态，可做好后涂kana ，和amp的平板，amp平板不长菌。而kana的平板长菌，试了三次都是一样，加大kana浓度也无效，在将感受态放入加了kana的LB中培养了，三天都不长菌，哪位仁兄帮忙说说这是怎么回事，我做的感受态是污染了吗？
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1楼 2010-05-17 22:48:07
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-18 06:20:03
感觉楼主说的比较混乱！
你中间说涂的是氨苄和卡纳的板子，氨苄的不长，卡纳的长了，后来又将同一个感受态接种到卡纳的LB中又不长了，我怀疑是不是你在中间涂卡纳的板子的时候染菌了啊？
验证你做的感受态是不是污染了的最好方法就是用一下试试！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2010-05-17 23:14:12
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QQS1988

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不好意思！我不懂。来顶贴来了。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-05-17 23:13:36
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小白兄

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
kana平板是什么时候的？会不会你的kana抗性平板失效了？
赞一下(1人) 回复此楼
时光如流水，匆匆而过。
4楼2010-05-17 23:16:57
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-18 06:20:31
我感觉楼主无菌操作过程中污染的可能性最大，我也建议做好感受态后你可以拿一个质粒转化试试，比如pUC18完整质粒！如果转化效果没问题，我想可以用这批感受态！别弄得那么复杂！！！
赞一下(2人) 回复此楼
大家共同交流、共同提高！！！
5楼2010-05-17 23:19:17
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