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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌感受态污染问题
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xj22667

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-18 22:27:35
严重怀疑是你的kan平板有问题
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11楼2010-05-18 13:07:41
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xj22667 at 2010-05-18 13:07:41:
严重怀疑是你的kan平板有问题

能进一步解释吗？
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12楼2010-05-18 20:58:29
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by QQS1988 at 2010-05-17 23:13:36:
不好意思！我不懂。来顶贴来了。

还是谢谢你呀。呵呵。
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13楼2010-05-18 21:02:35
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:27:20
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2010-05-17 23:14:12:
感觉楼主说的比较混乱！
你中间说涂的是氨苄和卡纳的板子，氨苄的不长，卡纳的长了，后来又将同一个感受态接种到卡纳的LB中又不长了，我怀疑是不是你在中间涂卡纳的板子的时候染菌了啊？
验证你做的感受态是不是 ...

我的意思是液体培养验证一下，要是没污染，加抗生素是长不出菌的，可涂板验证加kana就出现了问题。怀疑是涂棒污染了抗kana的菌，我要接着涂好好灭一下涂棒。
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14楼2010-05-18 21:08:32
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小白兄 at 2010-05-17 23:16:57:
kana平板是什么时候的？会不会你的kana抗性平板失效了？

倒完就涂板，不会失效吧，kana一直放在-20度保存的。况且液体中kana还是起作用的。
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15楼2010-05-18 21:10:17
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gene001 at 2010-05-17 23:19:17:
我感觉楼主无菌操作过程中污染的可能性最大，我也建议做好感受态后你可以拿一个质粒转化试试，比如pUC18完整质粒！如果转化效果没问题，我想可以用这批感受态！别弄得那么复杂！！！

这个主意不错，我这两天就转化一下。
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16楼2010-05-18 21:11:46
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-05-18 12:58:52:
问的都不清楚～～～

自己也觉得有点乱，就是空菌涂kana平板长菌，amp平板不长。但是感受态用液体加kana的LB培养基培养就不长。你能听明白吗？
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17楼2010-05-18 21:40:49
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csjiang1123

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-05-18 09:02:43:
实在不放心，这批感受态你就专门转化amp抗性的用掉，

这个主意不错。
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18楼2010-05-18 21:41:23
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oozhangbo

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主最后找到原因了吗？我最近也遇到了相同的情况啊，最后蛋白都不表达了
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19楼2015-10-29 21:21:21
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599092122a

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主找到原因了吗？我也碰到了，做的E.coil感受态，什么都不加，直接经过冰浴、热激、摇菌等步骤后然后涂板，kana板子长一片，Amp板子几乎不长
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20楼2018-06-02 11:21:08
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