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临风7071

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌BL21的问题 已有3人参与

我最近在做一个蛋白表达，连到pGEX－T4的载体上，转化到BL21中表达。但是我在网上看到，BL21作为表达宿主，主要是因为它把编码噬菌体T7 RNA ploymerase的整合到BL21的染色体上，当目的基因连接在含有T7启动子的表达载体上，转化到BL21中，就能实现蛋白的高表达，但是我想问一下，pGEX载体上没有T7启动子，只有tac启动子，那么我的连接在pGEX载体上的目的基因还能在BL21中高表达吗？哪位高手帮忙解决一下啊！
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1楼 2010-06-17 21:30:30
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★
临风7071(金币+2): 2010-06-18 00:42:36
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-06-18 11:52:09
可以表达。。。连接到pGEX－4T上的外源基因也能受IPTG诱导表达。。。T7启动子需要T7 RNA polymerase,但tac启动子不需要一样可以启动外源基因表达
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2楼2010-06-17 22:14:11
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
临风7071(金币+2): 2010-06-18 00:42:45
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-18 11:51:54
Tac(Trp+Lac)启动子其实是一套操纵子，转录使用的还是原核细胞自身的的RNA聚合酶，并不依赖外源的RNA聚合酶（例如T7系统）

Tac受IPTG诱导是去阻遏效应，Trp启动子负责启动转录，Lac操纵子负责诱导效应

原理和T7系统不一样的
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3楼2010-06-17 22:34:12
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临风7071

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-17 22:34:12:
Tac(Trp+Lac)启动子其实是一套操纵子，转录使用的还是原核细胞自身的的RNA聚合酶，并不依赖外源的RNA聚合酶（例如T7系统）

Tac受IPTG诱导是去阻遏效应，Trp启动子负责启动转录，Lac操纵子负责诱导效应

原理 ...

感谢楼主的回复，我已经搞懂了，谢谢
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4楼2010-06-18 00:43:30
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临风7071

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-06-17 22:14:11:
可以表达。。。连接到pGEX－4T上的外源基因也能受IPTG诱导表达。。。T7启动子需要T7 RNA polymerase,但tac启动子不需要一样可以启动外源基因表达

感谢楼主的回复，我已经搞懂了，谢谢
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5楼2010-06-18 00:44:13
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