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rendan911117

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[求助] 求助：EcoRI 和 XhoI双酶切已有12人参与

我双酶切用的酶 XhoI是赛默飞的 EcoRI是生工的做了好多次连接之后转化一直提不出质粒两个酶能一起双酶切吗如果可以 Buffer用哪个比较好啊有没有做过这两个酶双酶切的啊求指教拜托啦

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1楼 2014-09-19 10:06:15

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rendan911117

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 非常6+1 at 2014-09-19 10:54:21
两个不同公司的酶一起切问题不大，很有可能是你连接失败了，你完全可以先菌落PCR验证一下你的连接产物转化是否成功。转化成功了，不可能质粒提不出。若转化失败，可以考虑都用赛默飞的酶双切。

我之前菌落PCR 有的有条带有的没有然后提质粒的时候没提出来… 一个体系载体和目的基因的比例试了很多但是都没有提出质粒…