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heimei0211

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[交流] 双酶切buffer加多了

双酶切的时候，一走神，buffer多加了一倍，有什么影响吗？

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1楼 2013-06-04 09:41:09

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stevenshi021

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-04 12:38:39
heimei0211: 金币+1 2013-06-04 17:01:44

会影响酶切效率的，最简单的做法就是加水稀释一下就可以了，达到最终1X。

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2楼2013-06-04 09:58:45

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heimei0211

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1949stone: 最好的结果啦 2013-06-05 08:16:16

引用回帖:

2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-06-04 09:58:45
会影响酶切效率的，最简单的做法就是加水稀释一下就可以了，达到最终1X。

我直接没稀释，现在出来结果，没什么影响

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3楼2013-06-04 17:01:23

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m_marion

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1949stone: 金币+2, 还好吧 2013-06-05 08:16:59
heimei0211: 金币+4 2013-06-05 08:19:04

引用回帖:

3楼: Originally posted by heimei0211 at 2013-06-04 17:01:23
我直接没稀释，现在出来结果，没什么影响...

通用buffer一般是没什么影响，buffer浓度越高、盐浓度越高、酶的活性越低，所以有* activity的酶就是靠高盐浓度来抑制* activity，然后Fermentas干脆在许多地方直接推荐用2X浓度的Tango buffer，既可以抑制* activity又可以保证别的酶还能工作（虽然活性降低）。

不过Fermentas应该是图省事才尽量让大家“能用2X Tango buffer”就用2X，别家的酶没有这么玩的——Takara、NEB、Promega

[ Last edited by m_marion on 2013-6-4 at 17:06 ]

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4楼2013-06-04 17:05:14

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