应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切buffer加多了
71/1返回列表
查看: 4666  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

heimei0211

金虫 (小有名气)

[交流] 双酶切buffer加多了

双酶切的时候，一走神，buffer多加了一倍，有什么影响吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-06-04 09:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stevenshi021

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-04 12:38:39
heimei0211: 金币+1 2013-06-04 17:01:44
会影响酶切效率的，最简单的做法就是加水稀释一下就可以了，达到最终1X。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-04 09:58:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heimei0211

金虫 (小有名气)
1949stone: 最好的结果啦 2013-06-05 08:16:16
引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-06-04 09:58:45
会影响酶切效率的，最简单的做法就是加水稀释一下就可以了，达到最终1X。

我直接没稀释，现在出来结果，没什么影响
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-04 17:01:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

m_marion

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1949stone: 金币+2, 还好吧 2013-06-05 08:16:59
heimei0211: 金币+4 2013-06-05 08:19:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by heimei0211 at 2013-06-04 17:01:23
我直接没稀释，现在出来结果，没什么影响...

通用buffer一般是没什么影响，buffer浓度越高、盐浓度越高、酶的活性越低，所以有* activity的酶就是靠高盐浓度来抑制* activity，然后Fermentas干脆在许多地方直接推荐用2X浓度的Tango buffer，既可以抑制* activity又可以保证别的酶还能工作（虽然活性降低）。

不过Fermentas应该是图省事才尽量让大家“能用2X Tango buffer”就用2X，别家的酶没有这么玩的——Takara、NEB、Promega

[ Last edited by m_marion on 2013-6-4 at 17:06 ]
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-04 17:05:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuding6

木虫 (小有名气)
没多大影响的。
回复此楼
5楼2013-06-05 08:07:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heimei0211

金虫 (小有名气)
如果双酶切的话，是不同公司的酶，那一般是选择Fermentas的Buffer?
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-05 08:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

m_marion

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by heimei0211 at 2013-06-05 08:25:55
如果双酶切的话，是不同公司的酶，那一般是选择Fermentas的Buffer?

我们实验室也是四家的酶都有，酶么——同样的酶同样的甘油，互相替代没有问题，只是不要把条件不同的同切酶混淆了。而buffer我统一用Fermentas的buffer系统，有比较小资的师弟师妹选贵的用（NEB），我是觉得NEB的buffer还要额外加BSA太麻烦了所以不用。
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-05 12:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 heimei0211 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭