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双酶切buffer加多了
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heimei0211
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[交流]
双酶切buffer加多了
双酶切的时候,一走神,buffer多加了一倍,有什么影响吗?
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2013-06-04 09:41:09
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m_marion
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heimei0211: 金币+4
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引用回帖:
3楼
:
Originally posted by
heimei0211
at 2013-06-04 17:01:23
我直接没稀释,现在出来结果,没什么影响...
通用buffer一般是没什么影响,buffer浓度越高、盐浓度越高、酶的活性越低,所以有* activity的酶就是靠高盐浓度来抑制* activity,然后Fermentas干脆在许多地方直接推荐用2X浓度的Tango buffer,既可以抑制* activity又可以保证别的酶还能工作(虽然活性降低)。
不过Fermentas应该是图省事才尽量让大家“能用2X Tango buffer”就用2X,别家的酶没有这么玩的——Takara、NEB、Promega
[
Last edited by m_marion on 2013-6-4 at 17:06
]
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2013-06-04 17:05:14
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stevenshi021
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2013-06-04 12:38:39
heimei0211: 金币+1
2013-06-04 17:01:44
会影响酶切效率的,最简单的做法就是加水稀释一下就可以了,达到最终1X。
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2013-06-04 09:58:45
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heimei0211
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1949stone: 最好的结果啦
2013-06-05 08:16:16
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
stevenshi021
at 2013-06-04 09:58:45
会影响酶切效率的,最简单的做法就是加水稀释一下就可以了,达到最终1X。
我直接没稀释,现在出来结果,没什么影响
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3楼
2013-06-04 17:01:23
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heimei0211
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如果双酶切的话,是不同公司的酶,那一般是选择Fermentas的Buffer?
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6楼
2013-06-05 08:25:55
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