| 查看: 4554 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
冷雁孤旅木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助QPCR扩增效率的影响因素
|
|
|
各位大侠，小弟在做QPCR（SYBR），在验证引物可用性的时候 1.使用的模板是普通PCR产物的模板（做的原核生物，为了节约CDNA）2 UL,按照10倍梯度稀释 2.引物浓度时200MM 3.退火温度是57.5℃ 4.扩增条件：95℃ 30 S (1 CYCLE), 95℃ 5S（40 CYCLES） ,57.5℃ 31 S 20UL 体系 结果：溶解曲线是单峰，但是扩增效率太高了，有的基因达到200%， 我想求教大侠：在不换引物的前提下：1.使用PCR产物模板，是否模板浓度太高会使得扩增效率降低？ 2.退火温度提高了，是否会使得扩增效率降低？@西瓜 @biostar2009 @孙启亮 @cicelyzh |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有233人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 定量 扩增效率变低了怎么回事
已经有4人回复
- 请问qRT-PCR的标准曲线中扩增效率过高是怎么回事
已经有8人回复
- QPCR扩增曲线异常
已经有12人回复
- 你们的荧光定量检测引物扩增的标准曲线问题！求指教
已经有4人回复
- PCR单引物扩增问题
已经有7人回复
- 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
已经有15人回复
- 诚心求教各位前辈：筛选扩增体系时的PCR图片，这是怎么回事啊？
已经有5人回复
- 关于PCR 扩增 引物可以扩增多长的模板
已经有4人回复
- RT-PCR扩增效率
已经有7人回复
- 求长片段（7.5 kb）PCR扩增方法？
已经有17人回复
- 荧光定量扩增效率问题
已经有6人回复
- QPCR之 扩增效率
已经有8人回复
- QPCR之引物设计(二)
已经有10人回复
- QPCR扩增效率太低
已经有20人回复
- QPCR之 扩增效率
已经有8人回复
- QPCR 溶解曲线
已经有9人回复
- qPCR的标准曲线成线性很差，扩增效率低，是什么原因
已经有6人回复
- 求高人指点qpcr问题，扩增效率太高！
已经有14人回复
- 各位做qPCR的大侠看过来～～～～～～
已经有8人回复
- 我的实时定量溶解曲线图，有问题想请教各位！
已经有16人回复
- 着急！RT-PCR扩增效率低，情况很诡异，求助高手帮忙指点
已经有12人回复
- 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！
已经有12人回复
zhou阳阳
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1079.9
- 帖子: 26
- 在线: 24.1小时
- 虫号: 3003581
- 注册: 2014-02-28
- 性别: MM
- 专业: 农业有害生物检疫与入侵生
8楼2015-08-26 15:18:40
2楼2014-08-18 16:18:09
冷雁孤旅
木虫 (著名写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 3725.6
- 散金: 600
- 红花: 22
- 帖子: 1767
- 在线: 525.8小时
- 虫号: 1816501
- 注册: 2012-05-14
- 专业: 环境微生物学
3楼2014-08-19 00:14:39
yangxy04
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1376.8
- 红花: 1
- 帖子: 78
- 在线: 33.8小时
- 虫号: 3371790
- 注册: 2014-08-18
- 专业: 生物大分子结构与功能
冷雁孤旅4楼2014-08-20 16:47:07
