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三国恋

银虫 (小有名气)

[求助] 为什么要将待检DNA酶切连接到质粒中进行检测呢,直接检测不行吗? 已有1人参与

例如有文章中要用pcr方法检测HBV病毒,其先将HBV病毒酶切连接到质粒中在检测
Preparation of standard HBV DNA.   
We subcloned an HBV genome insert(nucleotides [nt] 1 to 2182) from pGEM7 into pBlueScript II SK(1) (Stratagene,La Jolla, Calif.). The recombinant plasmid was purified and subsequently quantified by measuring the optical density at 260 nm
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rst45

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流! 2014-07-24 21:32:01
三国恋: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-27 17:45:04
“Preparation of standard HBV DNA.”从标题来看,应该要求获得质量较高的HBV DNA,作为标准品使用。通过酶切的方式导入质粒,有以下优点:1.相对于PCR来说,不会引起DNA序列突变,保真性高,而且质粒较稳定,可长期保存;2.质粒容易纯化,减少宿主细胞基因组DNA的影响;3.容易定量,质粒骨架和HBV DNA序列清楚,可以用紫外分光光度法较精确地测定重组质粒的含量,包括摩尔数。
2楼2014-07-24 21:22:03
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