| 查看: 636 | 回复: 1 | |||
[求助]
为什么要将待检DNA酶切连接到质粒中进行检测呢，直接检测不行吗？ 已有1人参与
|
|
例如有文章中要用pcr方法检测HBV病毒，其先将HBV病毒酶切连接到质粒中在检测 Preparation of standard HBV DNA. We subcloned an HBV genome insert(nucleotides [nt] 1 to 2182) from pGEM7 into pBlueScript II SK(1) (Stratagene,La Jolla, Calif.). The recombinant plasmid was purified and subsequently quantified by measuring the optical density at 260 nm |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有84人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 单酶切失败。质粒验证显示正确，但是PCR验证与酶切验证出现很多问题，麻烦大家解决下
已经有4人回复
- 如何检测目的片段转没转到质粒上？
已经有16人回复
- 连接效率低，重组质粒无法酶切
已经有5人回复
- 用的pCDNA-5重组质粒，通过测序检验质粒+目的基因是否构建成功
已经有5人回复
- 如何获取目的质粒？
已经有8人回复
- 求去掉环状质粒中酶切位点和切后的质粒连接问题？
已经有7人回复
- 将目的基因连入表达质粒，酶切位点问题
已经有3人回复
- 目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。
已经有21人回复
- 电泳Maker 为什么要用λ-DNA 的酶切片段呢
已经有5人回复
- pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。
已经有23人回复
- 双酶切之后，线状质粒的连接问题
已经有13人回复
- 酶切酶连转化后单克隆检测不对
已经有8人回复
- 提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了
已经有18人回复
- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？
已经有13人回复
- 我酶切质粒后，电泳显示没有切开，是不是因为酶在外面放的时间长了？
已经有9人回复
- 质粒是否需要酶切后再电泳？
已经有9人回复
- 质粒DNA用EcoR1和HindⅢ双酶切后电泳图，求鉴
已经有6人回复
- 酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？
已经有6人回复
- 请教重组质粒快检的具体方法以及原理。。。。
已经有15人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
- 【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？
已经有24人回复
- 【求助/交流】质粒pPICZA酶切问题
已经有5人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-07-24 21:32:01
三国恋: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-27 17:45:04
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-07-24 21:32:01
三国恋: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-27 17:45:04
| “Preparation of standard HBV DNA.”从标题来看，应该要求获得质量较高的HBV DNA，作为标准品使用。通过酶切的方式导入质粒，有以下优点：1.相对于PCR来说，不会引起DNA序列突变，保真性高，而且质粒较稳定，可长期保存；2.质粒容易纯化，减少宿主细胞基因组DNA的影响；3.容易定量，质粒骨架和HBV DNA序列清楚，可以用紫外分光光度法较精确地测定重组质粒的含量，包括摩尔数。 |
2楼2014-07-24 21:22:03
20