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三国恋

银虫 (小有名气)

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[求助] 为什么要将待检DNA酶切连接到质粒中进行检测呢，直接检测不行吗？已有1人参与

例如有文章中要用pcr方法检测HBV病毒，其先将HBV病毒酶切连接到质粒中在检测
Preparation of standard HBV DNA.
We subcloned an HBV genome insert(nucleotides [nt] 1 to 2182) from pGEM7 into pBlueScript II SK(1) (Stratagene,La Jolla, Calif.). The recombinant plasmid was purified and subsequently quantified by measuring the optical density at 260 nm

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1楼 2014-07-14 15:37:02

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rst45

金虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-07-24 21:32:01
三国恋: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-27 17:45:04

“Preparation of standard HBV DNA.”从标题来看，应该要求获得质量较高的HBV DNA，作为标准品使用。通过酶切的方式导入质粒，有以下优点：1.相对于PCR来说，不会引起DNA序列突变，保真性高，而且质粒较稳定，可长期保存；2.质粒容易纯化，减少宿主细胞基因组DNA的影响；3.容易定量，质粒骨架和HBV DNA序列清楚，可以用紫外分光光度法较精确地测定重组质粒的含量，包括摩尔数。

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