应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体去磷酸化出现问题
291/3返回列表123下一页
查看: 2254  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

LAMME5

金虫 (小有名气)

[求助] 载体去磷酸化出现问题

楼主做单酶切位点连接转化实验，载体7500左右，先用EcoRV单酶切，大小没有问题，回收，然后做去磷酸化步骤，但是准备电泳回收是，载体大小变小了，只有2000左右了。已重复两次出现这种状况了，哪位大神能告诉怎么了呢，有没有经历过此种情况的啊   出来交流交流啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-10 21:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:07:50
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化，我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢
赞一下(1人) 回复此楼
24楼2014-07-11 07:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dylan苏木樨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:08:04
我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化，我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比，电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧，祝你成功
赞一下(1人) 回复此楼
26楼2014-07-14 16:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

pzx1004
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-10 21:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pzx1004
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-10 21:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pzx1004 at 2014-07-10 21:31:38
祝福

谢谢
回复此楼
4楼2014-07-10 21:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boyuehu
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
5楼2014-07-10 21:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的，瞅瞅！
回复此楼
原野孤鸿
6楼2014-07-10 21:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的，瞅瞅！
回复此楼
原野孤鸿
7楼2014-07-10 21:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vindichp
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
8楼2014-07-10 21:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vindichp
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
9楼2014-07-10 22:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kiss20085537
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
10楼2014-07-10 22:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LAMME5 的主题更新
291/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭