24小时热门版块排行榜    

查看: 2270  |  回复: 28

LAMME5

金虫 (小有名气)

[求助] 载体去磷酸化出现问题

楼主做单酶切位点连接转化实验,载体7500左右,先用EcoRV单酶切,大小没有问题,回收,然后做去磷酸化步骤,但是准备电泳回收是,载体大小变小了,只有2000左右了。已重复两次出现这种状况了,哪位大神能告诉怎么了呢,有没有经历过此种情况的啊   出来交流交流啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 10:07:50
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化,我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢
24楼2014-07-11 07:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dylan苏木樨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 10:08:04
我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化,我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比,电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧,祝你成功
26楼2014-07-14 16:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-10 21:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-10 21:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pzx1004 at 2014-07-10 21:31:38
祝福

谢谢
4楼2014-07-10 21:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
5楼2014-07-10 21:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)


LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
原野孤鸿
6楼2014-07-10 21:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)


LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
原野孤鸿
7楼2014-07-10 21:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
8楼2014-07-10 21:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
9楼2014-07-10 22:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
10楼2014-07-10 22:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LAMME5 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 312求调剂 +4 陌宸希 2026-03-16 5/250 2026-03-17 17:09 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工 +4 安全上岸! 2026-03-16 4/200 2026-03-17 14:02 by 勇敢太监王公公
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见