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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体去磷酸化后大小变大
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 载体去磷酸化后大小变大

载体单酶切以后进行了去磷酸化处理，跑电泳后发现去磷酸化的载体比单酶切的明显大很多，而且重复了很多次都这样，有人出现过类似的情况吗？求解答
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1楼2013-11-11 09:07:16
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-11 13:17:35
电泳不光与分子量相关，还与电荷数量相关，磷酸集团在生理条件下或者接近生理条件下是带负电荷的。
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2楼2013-11-11 10:29:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

所以酶切后去掉磷酸基团后的载体，与酶切之前未去掉磷酸基团的载体，用电泳不能直接比较彼此的相对分子量。
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3楼2013-11-11 10:31:36
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

要确定两者的精确分子量用质谱可测定，要确定酶切是否精确成功可以测序。
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4楼2013-11-11 10:33:26
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