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【求助/交流】xho1单酶切,总连不上(片段3K,载体5K) 已有6人参与
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由于目的片段的限制,只能单酶切。 片段3K,载体5K,用NEB的T4连接酶,10ul体系中加1ul酶,载体:片段=1:10。 16度连接过夜。连过很多次,总是长出很多菌落(多为载体自连),挑菌做pcr,没有条带。 到底是哪里的问题,还请各位帮忙!先谢谢了! |
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