应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体去磷酸化出现问题
291/3返回列表123下一页
查看: 2657  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

LAMME5

金虫 (小有名气)

[求助] 载体去磷酸化出现问题

楼主做单酶切位点连接转化实验，载体7500左右，先用EcoRV单酶切，大小没有问题，回收，然后做去磷酸化步骤，但是准备电泳回收是，载体大小变小了，只有2000左右了。已重复两次出现这种状况了，哪位大神能告诉怎么了呢，有没有经历过此种情况的啊   出来交流交流啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-10 21:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:07:50
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化，我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢
赞一下(1人) 回复此楼
24楼2014-07-11 07:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dylan苏木樨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:08:04
我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化，我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比，电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧，祝你成功
赞一下(1人) 回复此楼
26楼2014-07-14 16:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

pzx1004
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-10 21:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pzx1004
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-10 21:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pzx1004 at 2014-07-10 21:31:38
祝福

谢谢
回复此楼
4楼2014-07-10 21:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boyuehu
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
5楼2014-07-10 21:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的，瞅瞅！
回复此楼
原野孤鸿
6楼2014-07-10 21:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的，瞅瞅！
回复此楼
原野孤鸿
7楼2014-07-10 21:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vindichp
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
8楼2014-07-10 21:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vindichp
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
9楼2014-07-10 22:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kiss20085537
★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与
10楼2014-07-10 22:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LAMME5 的主题更新
291/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +11 sadpencil 2026-07-12 16/800 2026-07-13 11:25 by Vivilian
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 11:25 by emlgkvoijw
[有机交流] 轴手性化合物的确定 10+3 trimethoxy 2026-07-07 4/200 2026-07-13 11:18 by celan
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 11:15 by emlgkvoijw
[考研] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 obzynn3tuv 2026-07-11 5/250 2026-07-13 11:05 by emlgkvoijw
[基金申请] 明天E口面上会评 +4 布布和一二 2026-07-12 5/250 2026-07-13 10:44 by zzybjr
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 10:35 by emlgkvoijw
[考博] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 10:25 by emlgkvoijw
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 3/150 2026-07-13 09:56 by emlgkvoijw
[考博] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 00:24 by v2i90kmrcu
[基金申请] 祈祷青基必中 50+6 hadengry 2026-07-09 16/800 2026-07-12 20:31 by 登山虫虫
[基金申请] 生命口会评 +11 wuke100666 2026-07-07 12/600 2026-07-11 19:30 by hhs666
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +17 且听虎啸 2026-07-09 23/1150 2026-07-10 19:51 by sdfapple719
[有机交流] chemdraw 20+5 ?慕鱼? 2026-07-08 6/300 2026-07-10 15:37 by 紫枫星域
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +3 S778950906 2026-07-08 5/250 2026-07-09 15:46 by S778950906
[有机交流] 硝基还原 20+3 暮年飞雪 2026-07-07 5/250 2026-07-09 13:30 by tfang
[基金申请] 化学口会评？应用基础研究和基础研究，希望能分开 +3 Tide man 2026-07-08 3/150 2026-07-09 11:36 by dede5556
[有机交流] Suzuki偶联中硼酸酯原料掉下的硼酸酯是否可以自身偶联，生成B2Pin2杂质 500+3 天下大同 2026-07-06 3/150 2026-07-07 10:31 by martyr_oyx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭