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yangchengg

★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与

21楼2014-07-10 22:09:42

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lengzhongy

★
LAMME5(金币+1): 谢谢参与

支持

22楼2014-07-10 22:09:47

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学生于川

23楼2014-07-10 22:10:23

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yzj926521

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:07:50

不知道你为什么是在回收后再去磷酸化，我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢

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24楼2014-07-11 07:27:49

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LAMME5

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

24楼: Originally posted by yzj926521 at 2014-07-11 07:27:49
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化，我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢

我这样做也是为了是CIAP能在更好的缓冲液里作用的啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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25楼2014-07-11 09:33:05

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Dylan苏木樨

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:08:04

我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化，我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比，电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧，祝你成功

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26楼2014-07-14 16:22:40

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0405lanfeng

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专业: 植物生理与生化

引用回帖:

26楼: Originally posted by Dylan苏木樨 at 2014-07-14 16:22:40
我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化，我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比，电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧，祝你成功

请教你用的哪个公司的去磷酸化酶？

[ 发自小木虫客户端 ]

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27楼2014-07-15 00:15:58

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