24小时热门版块排行榜    

查看: 2288  |  回复: 28

LAMME5

金虫 (小有名气)

[求助] 载体去磷酸化出现问题

楼主做单酶切位点连接转化实验,载体7500左右,先用EcoRV单酶切,大小没有问题,回收,然后做去磷酸化步骤,但是准备电泳回收是,载体大小变小了,只有2000左右了。已重复两次出现这种状况了,哪位大神能告诉怎么了呢,有没有经历过此种情况的啊   出来交流交流啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 10:07:50
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化,我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢
24楼2014-07-11 07:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dylan苏木樨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 10:08:04
我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化,我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比,电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧,祝你成功
26楼2014-07-14 16:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-10 21:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-10 21:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pzx1004 at 2014-07-10 21:31:38
祝福

谢谢
4楼2014-07-10 21:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
5楼2014-07-10 21:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)


LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
原野孤鸿
6楼2014-07-10 21:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)


LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
原野孤鸿
7楼2014-07-10 21:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
8楼2014-07-10 21:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
9楼2014-07-10 22:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
10楼2014-07-10 22:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LAMME5 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 7/350 2026-03-17 20:20 by 花125533
[考研] 301求调剂 +5 yy要上岸呀 2026-03-17 5/250 2026-03-17 20:20 by peike
[考研] 化学工程321分求调剂 +11 大米饭! 2026-03-15 14/700 2026-03-17 17:11 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么! 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗? 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见