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bingdong05银虫 (正式写手)
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可容纳大片段的载体 已有3人参与
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| 最近准备做克隆，可目的片段太长，几个片段加起来约20kb，不知道利用什么载体及宿主菌合适，望知道的虫友不吝赐教，多谢。 |
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huangrui1988 
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6楼2014-02-14 21:17:47
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bingdong05: 金币+3 2014-02-18 16:56:00
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bingdong05: 金币+3 2014-02-18 16:56:00
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酵母人工染色体（YAC)是人工染色体中能克隆最大DNA片段的载体，可以插入100-2000kb的外源DNA片段。YAC是有酵母的自主复制序列、着丝点、四膜虫的端粒以及酵母选择性标记组成的酵母线性克隆载体。左臂含有端粒、酵母筛选标记Trp1、自主复制序列ARS和着丝粒，右臂含有酵母筛选标记Ura3和端粒，然后在两臂之间插入大片段DNA构成的。 优点 可以容纳更长的DNA片段，用较少的克隆就可以包含特定的基因组全部序列，从而保持了基因组特定序列的完整性，有利于物理图谱的制作。 缺点 （1）克隆外源基因易出现嵌合体。 （2）有些克隆不稳定。 （3）YAC克隆不容易与酵母自身染色体相分离。 应用领域 在染色体区带构建YAC重叠群，可以促进大规模基因组测序和致病基因的克隆。 |
7楼2014-02-15 11:03:29
gyesang: 屏蔽内容 2014-02-15 16:56:22
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8楼2014-02-15 14:27:13
