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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体去磷酸化出现问题
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LAMME5

金虫 (小有名气)

[求助] 载体去磷酸化出现问题

楼主做单酶切位点连接转化实验，载体7500左右，先用EcoRV单酶切，大小没有问题，回收，然后做去磷酸化步骤，但是准备电泳回收是，载体大小变小了，只有2000左右了。已重复两次出现这种状况了，哪位大神能告诉怎么了呢，有没有经历过此种情况的啊   出来交流交流啊
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1楼 2014-07-10 21:29:42
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yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 10:07:50
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化，我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢
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24楼2014-07-11 07:27:49
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