24小时热门版块排行榜    

查看: 2282  |  回复: 28

LAMME5

金虫 (小有名气)

[求助] 载体去磷酸化出现问题

楼主做单酶切位点连接转化实验,载体7500左右,先用EcoRV单酶切,大小没有问题,回收,然后做去磷酸化步骤,但是准备电泳回收是,载体大小变小了,只有2000左右了。已重复两次出现这种状况了,哪位大神能告诉怎么了呢,有没有经历过此种情况的啊   出来交流交流啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 10:07:50
不知道你为什么是在回收后再去磷酸化,我的操作是在但酶切反应结束前半个小时的时候加入十分之一体积的碱性磷酸酶。
你出现的这种情况还真不知道什么原因呢
24楼2014-07-11 07:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dylan苏木樨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-15 10:08:04
我的个人经验是不用电泳回收再去磷酸化,我之前试过酶切完直接往酶切反应体系中加去磷酸化酶去磷酸化和电泳后去磷酸化的效果对比,电泳去磷酸化的效果很是不理想呢。再试试吧,祝你成功
26楼2014-07-14 16:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-10 21:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-07-10 21:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pzx1004 at 2014-07-10 21:31:38
祝福

谢谢
4楼2014-07-10 21:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
5楼2014-07-10 21:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)


LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
原野孤鸿
6楼2014-07-10 21:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanyeguhong

至尊木虫 (文坛精英)


LAMME5(金币+1): 谢谢参与
路过的,瞅瞅!
原野孤鸿
7楼2014-07-10 21:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
8楼2014-07-10 21:59:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
9楼2014-07-10 22:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LAMME5(金币+1): 谢谢参与
10楼2014-07-10 22:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 LAMME5 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +4 慕寒mio 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:17 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 10/500 2026-03-17 15:07 by 一鸭鸭哟
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +6 SUICHILD 2026-03-12 6/300 2026-03-17 09:24 by 雾散后相遇lc
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见