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nlhnq55

银虫 (小有名气)

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[求助] 活性污泥中DNA模板的提取成功，但PCR扩增不出条带。已有3人参与

使用FastDNA® SPIN kit for Soil分别提取 “土壤” 和 “活性污泥” 中的细菌DNA模板，总DNA模板直接电泳检测，条带都非常亮。但是PCR扩增16S rRNA基因，只有土壤的模板正常出带

，活性污泥的样品不出带 ，或者条带非常非常弱和弥散

。

我看文章中，大家都使用这个试剂盒提取活性污泥中的DNA模板的，为什么我用就不行了呢？
不换了多个活性污泥样品，结果一样的。
PCR扩增其他的基因，也是上面一样的结果。

非常着急，困扰我的实验很久了，一直解决不了啊

。
大家遇到过类似的情况吗？请帮我分析分析吧

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无穷般若心自在，语默动静体自然

1楼2014-06-20 20:38:12

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coolale

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
nlhnq55: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-28 21:41:57

发酵残余物和活性污泥的DNA提取好像和土壤不太一样，我自己也快要提了，不过还没试过。降低腐植酸好像是一点【秸秆沼气干发酵基质中微生物dna 提取方法筛选】，然后就是提取效率，就是能提出来的DNA占总量的多少（一般偏低）【Evaluation of several DNA extraction methods for obtaining total community DNA from anaerobic digestion sludge】。
文献没找到多少，我也还再研究