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活性污泥中DNA模板的提取成功，但PCR扩增不出条带。 已有3人参与
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使用FastDNA® SPIN kit for Soil分别提取 “土壤” 和 “活性污泥” 中的细菌DNA模板，总DNA模板直接电泳检测，条带都非常亮。但是PCR扩增16S rRNA基因，只有土壤的模板正常出带  ，活性污泥的样品不出带 ，或者条带非常非常弱和弥散 。我看文章中，大家都使用这个试剂盒提取活性污泥中的DNA模板的，为什么我用就不行了呢？ 不换了多个活性污泥样品，结果一样的。 PCR扩增其他的基因，也是上面一样的结果。 非常着急，困扰我的实验很久了，一直解决不了啊  。大家遇到过类似的情况吗 ？ 请帮我分析分析吧 |
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【答案】应助回帖
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nlhnq55: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-28 21:41:57
nlhnq55: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-28 21:41:57
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发酵残余物和活性污泥的DNA提取好像和土壤不太一样，我自己也快要提了，不过还没试过。降低腐植酸好像是一点【秸秆沼气干发酵基质中微生物dna 提取方法筛选】，然后就是提取效率，就是能提出来的DNA占总量的多少（一般偏低）【Evaluation of several DNA extraction methods for obtaining total community DNA from anaerobic digestion sludge】。 文献没找到多少，我也还再研究 |
3楼2014-06-27 23:17:36
肥猫p
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RuyangHan
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