| 查看: 1167 | 回复: 4 | ||
[求助]
活性污泥中DNA模板的提取成功，但PCR扩增不出条带。 已有3人参与
|
使用FastDNA® SPIN kit for Soil分别提取 “土壤” 和 “活性污泥” 中的细菌DNA模板，总DNA模板直接电泳检测，条带都非常亮。但是PCR扩增16S rRNA基因，只有土壤的模板正常出带  ，活性污泥的样品不出带 ，或者条带非常非常弱和弥散 。我看文章中，大家都使用这个试剂盒提取活性污泥中的DNA模板的，为什么我用就不行了呢？ 不换了多个活性污泥样品，结果一样的。 PCR扩增其他的基因，也是上面一样的结果。 非常着急，困扰我的实验很久了，一直解决不了啊  。大家遇到过类似的情况吗 ？ 请帮我分析分析吧 |
回复此楼» 猜你喜欢
297求调剂
已经有16人回复
-
326分，一志愿沪9，求生物学调剂
已经有4人回复
-
288求调剂，一志愿华南理工大学071005
已经有3人回复
-
304求调剂
已经有13人回复
-
调剂
已经有18人回复
-
293调剂
已经有4人回复
-
338求调剂
已经有7人回复
-
263求调剂
已经有3人回复
-
求调剂
已经有15人回复
-
机械工程264学硕求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 水煮法提取金黄色葡萄球菌DNAPCR扩增后没有条带
已经有5人回复
- 高GC模版扩增不出条带，求PCR高手
已经有5人回复
- 请教PCR高手关于扩增DNA时的问题！
已经有5人回复
- 引物浓度不一致会导致PCR无扩增带么？
已经有7人回复
- 电泳的时候，总DNA跑出条带，PCR扩增后没有条带，都有什么原因啊
已经有8人回复
- 我做质粒扩增诱变pcr 结果正确，但是转化进入感受态不长菌，为何？
已经有3人回复
- 全长PCR扩增的非特异性条带去不掉咋办
已经有4人回复
- 竞争性等位特异性PCR扩增不出条带
已经有8人回复
- PCR 扩增条带大小不对
已经有10人回复
- PCR扩增DNA序列无条带
已经有46人回复
- 欲PCR扩增4200bp左右的目的片段，一直得不到目的条带，求高人指教！
已经有25人回复
- PCR扩增出来的条带,与预计大小一致,测序居然什么都不是????
已经有4人回复
- PCR扩增不出目的条带
已经有12人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- 为什么做PCR时候模板浓度高了会扩增不出目的片段？
已经有11人回复
- 以酵母基因组为模板进行PCR扩增没有条带
已经有6人回复
- 试剂盒提取细菌DNA后，跑胶检测有条带，但是PCR后却无扩增产物。
已经有10人回复
- 用PCR扩增后的DNA如何测序？不能直接用PCR就知道是什么菌种之类的吧？
已经有6人回复
- OVER-LAP PCR第二轮扩增不出来条带
已经有6人回复
- PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？
已经有4人回复
- 基因组dna检测条带很亮 PCR扩增后条带非常弱 求助
已经有3人回复
- PCR扩增不出条带
已经有9人回复
- 天根公司的Long Taq DNA Polymerase的PCR扩增产物是平末端还是带A尾巴？
已经有8人回复
- 求助！PCR扩增不出全长DNA序列怎么办？
已经有24人回复
- 【求助/交流】以cDNA为模板PCR扩增目的片段时条带较浅原因
已经有13人回复
肥猫p
木虫 (正式写手)
- 应助: 94 (初中生)
- 金币: 2763.1
- 散金: 145
- 红花: 10
- 帖子: 340
- 在线: 189.3小时
- 虫号: 1709733
- 注册: 2012-03-22
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2014-06-20 23:35:37
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
nlhnq55: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-28 21:41:57
nlhnq55: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-06-28 21:41:57
|
发酵残余物和活性污泥的DNA提取好像和土壤不太一样，我自己也快要提了，不过还没试过。降低腐植酸好像是一点【秸秆沼气干发酵基质中微生物dna 提取方法筛选】，然后就是提取效率，就是能提出来的DNA占总量的多少（一般偏低）【Evaluation of several DNA extraction methods for obtaining total community DNA from anaerobic digestion sludge】。 文献没找到多少，我也还再研究 |
3楼2014-06-27 23:17:36
4楼2014-08-22 21:13:31
RuyangHan
金虫 (小有名气)
- 应助: 82 (初中生)
- 金币: 1130.1
- 散金: 62
- 红花: 7
- 帖子: 165
- 在线: 174.8小时
- 虫号: 2725361
- 注册: 2013-10-15
- 专业: 环境微生物学
5楼2014-08-22 22:55:18
