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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教PCR高手关于扩增DNA时的问题！
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将陈爱喝茶

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请教PCR高手关于扩增DNA时的问题！已有3人参与

我从黄瓜的基因组里面扩增一段DNA，扩增完了以后，通过比对发现比完整的DNA序列要短很多，经过一系列比对才发现没有扩增到的片段全部都是内含子的部分。问题怪就怪在：这些内含子有些时候能扩出来，有些时候扩不出来！这是什么原因呢？跟我的PCR的protocol有关吗？
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1楼2014-05-29 20:47:43
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
目测是取样问题吧，取样怎么取得啊
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-05-29 21:46:55
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将陈爱喝茶

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-05-29 21:46:55
目测是取样问题吧，取样怎么取得啊

取苗期叶片,塞离心管里面 CTAB法提DNA
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3楼2014-05-29 23:05:55
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 将陈爱喝茶 at 2014-05-29 23:05:55
取苗期叶片,塞离心管里面 CTAB法提DNA...

那就是你的材料和已经报道的不一样呗
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
4楼2014-05-29 23:08:08
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冰凝东

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
将陈爱喝茶(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-15 21:12:18
不同品种同一基因的内含子可能会有差别，家族基因序列相似但内含子可能有较大差别，进化中内含子更容易发生突变……
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5楼2014-06-15 13:02:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
将陈爱喝茶(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-15 21:12:30
你设计引物的时候选的区段，然后，你的引物特异性，退火温度，PCR后的电泳结果，你要表述清楚了我们才可能帮到你哈

[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼2014-06-15 20:30:45
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