应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于提取DNA的纯度对后续PCR的影响
81/1返回列表
查看: 2821  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

aixiaoxi123

铁虫 (初入文坛)

[交流] 关于提取DNA的纯度对后续PCR的影响

科研新手，请教大家用试剂盒提取的DNA的纯度对后续的PCR和QPCR有什么影响？还有大家一般提取的核酸的浓度是多少？用多大浓度的DNA模板做PCR效果比较好？希望大家多多指教，先谢谢啦
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-05-06 16:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hxs-520

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-06 21:04:15
aixiaoxi123: 金币+2 2012-05-11 20:35:21
5-50ng 的浓度就会得到很理想的结果，而且DNA提取试剂盒都是已经商业化的技术，在纯度上肯定不会有很大的出入。祝你试验顺利。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

aixiaoxi123
2楼2012-05-06 18:34:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dabinyang

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-06 21:04:20
aixiaoxi123: 金币+1 2012-05-11 20:35:47
看你做什么的，如果做普通PCR，循环数在30以内，没有什么影响，现在都还有把一小块组织直接拿去PCR的产品那。
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-06 19:52:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aixiaoxi123

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hxs-520 at 2012-05-06 18:34:56:
5-50ng 的浓度就会得到很理想的结果，而且DNA提取试剂盒都是已经商业化的技术，在纯度上肯定不会有很大的出入。祝你试验顺利。

我是怕模版不纯会影响后期的PCR结果，比如有蛋白质或其他物质的抑制作用等等，那你看会不会呢？
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-07 09:51:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aixiaoxi123

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dabinyang at 2012-05-06 19:52:33:
看你做什么的，如果做普通PCR，循环数在30以内，没有什么影响，现在都还有把一小块组织直接拿去PCR的产品那。

如果后期还想做定量PCR呢？想让结果比较可靠点
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-07 09:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zhaohq1209: 金币+2, 鼓励回帖交流~ 2012-05-08 06:35:56
aixiaoxi123: 金币+1 2012-05-11 20:36:07
如果后期要做定量只要里面没有RNA的污染，并且定量前做好浓度监测，就不会有太大的问题，否则你非要考虑起始浓度影响就要选择其他方式来进行DNA定量了，至于蛋白的污染如果跑普通PCR电泳的时候会在上样孔的地方显示特别亮，至于定量时蛋白污染的问题我就不知道了。
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-07 13:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dabinyang

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
aixiaoxi123: 金币+1 2012-05-11 20:36:16
引用回帖:
5楼: Originally posted by aixiaoxi123 at 2012-05-07 09:52:48:
如果后期还想做定量PCR呢？想让结果比较可靠点

看你定量的方法，相对定量和总浓度没太大关系。
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-08 01:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fangfeiyayun

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你要是担心纯度的话，可以在纯化一次，用试剂盒纯化即可。
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-09 07:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aixiaoxi123 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭