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aixiaoxi123

铁虫 (初入文坛)


[交流] 关于提取DNA的纯度对后续PCR的影响

科研新手,请教大家用试剂盒提取的DNA的纯度对后续的PCR和QPCR有什么影响?还有大家一般提取的核酸的浓度是多少?用多大浓度的DNA模板做PCR效果比较好?希望大家多多指教,先谢谢啦
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dabinyang

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-06 21:04:20
aixiaoxi123: 金币+1 2012-05-11 20:35:47
看你做什么的,如果做普通PCR,循环数在30以内,没有什么影响,现在都还有把一小块组织直接拿去PCR的产品那。
3楼2012-05-06 19:52:33
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hxs-520

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-06 21:04:15
aixiaoxi123: 金币+2 2012-05-11 20:35:21
5-50ng 的浓度就会得到很理想的结果,而且DNA提取试剂盒都是已经商业化的技术,在纯度上肯定不会有很大的出入。祝你试验顺利。

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2楼2012-05-06 18:34:56
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aixiaoxi123

铁虫 (初入文坛)


送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hxs-520 at 2012-05-06 18:34:56:
5-50ng 的浓度就会得到很理想的结果,而且DNA提取试剂盒都是已经商业化的技术,在纯度上肯定不会有很大的出入。祝你试验顺利。

我是怕模版不纯会影响后期的PCR结果,比如有蛋白质或其他物质的抑制作用等等,那你看会不会呢?
4楼2012-05-07 09:51:59
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aixiaoxi123

铁虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by dabinyang at 2012-05-06 19:52:33:
看你做什么的,如果做普通PCR,循环数在30以内,没有什么影响,现在都还有把一小块组织直接拿去PCR的产品那。

如果后期还想做定量PCR呢?想让结果比较可靠点
5楼2012-05-07 09:52:48
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