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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶切 星活性 已有2人参与

什么是 酶切星活性呢?   怎么在 论坛里 没找到具体是指 什么呢
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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永峰1230(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-20 16:44:40
永峰1230: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-06-20 18:20:18
星星活性就是指反应条件不同而产生的切断与原来认识序列不同的位点的现象。
诱发星活性的因素有如下几种:
(1)高甘油含量(>5%, v/v);
(2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U/ugDNA);
(3)低离子强度(<25 mmol/L);
(4)高pH(8.0以上);(5)含有有机溶剂,如DMSO,乙醇等;
(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+,Cu2+,C02+,Zn2+等
以上出自百度、其他帖子。

一般我们用酶切的话,酶不要超过酶切总体积的1/10,Buffer加总体积的1/10就可以了。
2楼2014-06-20 15:37:31
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jiajiav1991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-06-21 00:58:23
永峰1230: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-06-21 10:54:17
限制酶根据反应条件的不同,可能会切断与原来识别序列不同的位点, 这种不同于原有的特异性的活性,称为Star活性,即星活性。
我不想站得多高,看得多远,只想做好手上的每一件事。
3楼2014-06-20 22:59:29
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