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永峰1230

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[求助] 酶切星活性已有2人参与

什么是酶切星活性呢？

怎么在论坛里没找到具体是指什么呢

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1楼2014-06-20 14:47:11

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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永峰1230(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-06-20 16:44:40
永峰1230: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-06-20 18:20:18

星星活性就是指反应条件不同而产生的切断与原来认识序列不同的位点的现象。
诱发星活性的因素有如下几种：
(1)高甘油含量(>5％, v／v)；
(2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；
(3)低离子强度(<25 mmol／L)；
(4)高pH(8.0以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；
(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等
以上出自百度、其他帖子。

一般我们用酶切的话，酶不要超过酶切总体积的1/10，Buffer加总体积的1/10就可以了。