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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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liuwei78

铜虫 (小有名气)

[求助] 帮忙分析下这两幅电泳图

下面是质粒和PCR产物单酶切后的电泳图,其中第一幅图是质粒和PCR产物分别酶切2h和5h后的电泳图,第二幅是质粒和PCR产物酶切12h的电泳图。都跑的不清楚,特别是第二幅图。是因为酶切时间太长么?另外奇怪的是,每次加完loading buffer 上样,跑电泳时看到的溴酚蓝的指示条带都是弥散的,以前从未遇到这种情况过?是因为loading  buffer 坏了么,从而影响了我的电泳图?
请大家帮忙解释下啊。不甚感激!!!


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nicole1124

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 欢迎交流 2011-07-26 20:51:18
liuwei78(金币+5): 2011-07-27 10:52:20
把TAE换成新的,用久了也会出现这种条带弯曲的现象
2楼2011-07-26 16:53:46
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liuwei78

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by nicole1124 at 2011-07-26 16:53:46:
把TAE换成新的,用久了也会出现这种条带弯曲的现象

TAE是新的。marker没有问题,应该不是这个原因吧。
3楼2011-07-26 18:38:04
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-26 20:28:53
liuwei78(金币+5): 2011-07-27 10:52:39
应该是胶的原因,mark条带其实也有点拖,TAE是新配的还是跟上次用过的?另外你酶切怎么时间那么长,2h足矣,时间太长了容易产生星活性,不利于下一步的连接反应
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-26 20:01:18
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
liuwei78(金币+5): 2011-07-27 08:19:16
dhd997(金币+2): good 2011-07-30 13:29:07
marker跑地挺好的,胶和电泳液肯定没问题,点样点地太多吧,另外把酶失活后再跑试试,这带跑得挺像emsa 的。
生命不息,探索不止。
5楼2011-07-26 23:06:29
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