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liuwei78

铜虫 (小有名气)

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[求助] 帮忙分析下这两幅电泳图

下面是质粒和PCR产物单酶切后的电泳图，其中第一幅图是质粒和PCR产物分别酶切2h和5h后的电泳图，第二幅是质粒和PCR产物酶切12h的电泳图。都跑的不清楚，特别是第二幅图。是因为酶切时间太长么？另外奇怪的是，每次加完loading buffer 上样，跑电泳时看到的溴酚蓝的指示条带都是弥散的，以前从未遇到这种情况过？是因为loading buffer 坏了么，从而影响了我的电泳图？
请大家帮忙解释下啊。不甚感激！！！

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1楼 2011-07-26 16:06:48

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空谷幽风

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【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-26 20:28:53
liuwei78(金币+5): 2011-07-27 10:52:39

应该是胶的原因，mark条带其实也有点拖，TAE是新配的还是跟上次用过的？另外你酶切怎么时间那么长，2h足矣，时间太长了容易产生星活性，不利于下一步的连接反应

赞一下(1人)

a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?

4楼2011-07-26 20:01:18

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