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PCR相关问题。。求指导。。谢谢 已有3人参与
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想将一个77bp的启动子与3000bp片段连接。 因此，小弟准备把77bp启动子序列加在正向引物前，直接做pcr，扩增出含启动子的目的片段。 请问，这样利用近100bp的引物做pcr扩增可行吗?忘高手指导下，谢谢啦。 |
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4楼2014-05-07 03:37:34
Neo2000
木虫 (著名写手)
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- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-05-06 20:04:51
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liulugang(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-06 22:14:24
liulugang: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-05-07 10:13:35
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你的那条引物估计都要上千。我曾经把一条穿膜肽（30个氨基酸，90个碱基）加在一个蛋白的5端，PCR没有问题。 如果你不需要精确转录的话，可以考虑针对77bp启动子设计两段引物（约50bp）（带酶切位点），中间大概（20-30bp重叠序列），做一个引物PCR就可以把你这段启动子扩增出来。然后通过酶切与你的目的基因相连。 超过60个碱基，价格算法不一样。 |
3楼2014-05-06 21:47:24
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