[交流] PCR扩增曲线往下趴的厉害，求原因，谢谢

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有205人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:
查看全部散金贴

1楼2013-08-27 16:55:20

love_st

金虫 (著名写手)

MolEPI: 1
应助: 48 (小学生)
金币: 285.4
帖子: 1596
在线: 1538.2小时
虫号: 743235

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wangxw310(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-27 17:14:41

两个方面：
引物探针设计不理想
体系是否有问题，特别是你所用的酶，不知道你是RNA的还是DNA的，你试着换别的酶试试

2楼2013-08-27 16:59:10

wangxw310

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 17.1
帖子: 10
在线: 7.9小时
虫号: 2531795

引用回帖:

2楼: Originally posted by love_st at 2013-08-27 16:59:10
两个方面：
引物探针设计不理想
体系是否有问题，特别是你所用的酶，不知道你是RNA的还是DNA的，你试着换别的酶试试

换了好几个公司的酶，结果都是这样，我的是RNA经过了逆转录

3楼2013-08-27 17:03:30

love_st

金虫 (著名写手)

MolEPI: 1
应助: 48 (小学生)
金币: 285.4
帖子: 1596
在线: 1538.2小时
虫号: 743235

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wangxw310: 金币+1 2013-08-28 13:25:25

引用回帖:

3楼: Originally posted by wangxw310 at 2013-08-27 17:03:30
换了好几个公司的酶，结果都是这样，我的是RNA经过了逆转录...

你如果是探针法的话，就围绕探针再多设计几对引物，肯定可以筛选出合适的引物，因为你的高浓度的模板扩增不错，说明探针效率可以

4楼2013-08-28 09:12:59

漩涡鸣人

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.5
帖子: 8
在线: 1.2小时
虫号: 1215674

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我的也不行惨死了，想发个帖还么有金币。。。

5楼2014-01-06 21:02:55

漩涡鸣人

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.5
帖子: 8
在线: 1.2小时
虫号: 1215674

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我的就到不了平台期，不知道仁兄怎么解决的

6楼2014-01-06 21:09:45

vege的桌子

铜虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 490.9
帖子: 130
在线: 173.3小时
虫号: 1352276

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

走一下引物和探针的用量，还不行的话只能重新设计了，应该是探针的问题

7楼2014-01-08 14:02:15

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

MolEPI: 1
应助: 905 (博后)
金币: 16466.5
帖子: 14449
在线: 2169.9小时
虫号: 514340

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

模板量太少，基本上是本底水平，起来的信号还不一定是扩增产物

8楼2014-01-08 14:24:56