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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR扩增曲线往下趴的厉害，求原因，谢谢
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wangxw310

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR扩增曲线往下趴的厉害，求原因，谢谢

最近做一病毒荧光定量PCR扩增曲线，曲线总是往下趴，到CT28左右就没有了，求各位大神给点建议！
PCR扩增曲线往下趴的厉害，求原因，谢谢
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1楼 2013-08-27 16:55:20
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love_st

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wangxw310(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-27 17:14:41
两个方面：
引物探针设计不理想
体系是否有问题，特别是你所用的酶，不知道你是RNA的还是DNA的，你试着换别的酶试试
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2楼2013-08-27 16:59:10
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wangxw310

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2013-08-27 16:59:10
两个方面：
引物探针设计不理想
体系是否有问题，特别是你所用的酶，不知道你是RNA的还是DNA的，你试着换别的酶试试

换了好几个公司的酶，结果都是这样，我的是RNA经过了逆转录
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3楼2013-08-27 17:03:30
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love_st

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wangxw310: 金币+1 2013-08-28 13:25:25
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangxw310 at 2013-08-27 17:03:30
换了好几个公司的酶，结果都是这样，我的是RNA经过了逆转录...

你如果是探针法的话，就围绕探针再多设计几对引物，肯定可以筛选出合适的引物，因为你的高浓度的模板扩增不错，说明探针效率可以
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4楼2013-08-28 09:12:59
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漩涡鸣人

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的也不行惨死了，想发个帖还么有金币。。。
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5楼2014-01-06 21:02:55
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漩涡鸣人

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的就到不了平台期，不知道仁兄怎么解决的
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6楼2014-01-06 21:09:45
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vege的桌子

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
走一下引物和探针的用量，还不行的话只能重新设计了，应该是探针的问题
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7楼2014-01-08 14:02:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
模板量太少，基本上是本底水平，起来的信号还不一定是扩增产物
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8楼2014-01-08 14:24:56
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