[交流] PCR扩增曲线往下趴的厉害，求原因，谢谢

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1楼2013-08-27 16:55:20

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

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模板量太少，基本上是本底水平，起来的信号还不一定是扩增产物

8楼2014-01-08 14:24:56

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love_st

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wangxw310(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-27 17:14:41

两个方面：
引物探针设计不理想
体系是否有问题，特别是你所用的酶，不知道你是RNA的还是DNA的，你试着换别的酶试试

2楼2013-08-27 16:59:10

wangxw310

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引用回帖:

2楼: Originally posted by love_st at 2013-08-27 16:59:10
两个方面：
引物探针设计不理想
体系是否有问题，特别是你所用的酶，不知道你是RNA的还是DNA的，你试着换别的酶试试

换了好几个公司的酶，结果都是这样，我的是RNA经过了逆转录

3楼2013-08-27 17:03:30

love_st

金虫 (著名写手)

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wangxw310: 金币+1 2013-08-28 13:25:25

引用回帖:

3楼: Originally posted by wangxw310 at 2013-08-27 17:03:30
换了好几个公司的酶，结果都是这样，我的是RNA经过了逆转录...

你如果是探针法的话，就围绕探针再多设计几对引物，肯定可以筛选出合适的引物，因为你的高浓度的模板扩增不错，说明探针效率可以

4楼2013-08-28 09:12:59