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樊樊

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[求助] 各位大神，求助：PCR产物纯化后没有条带了……已有3人参与

目的DNApcr扩增出来条带在1500bp左右，条带明亮单一，符合我的实验要求。p了50微升体系，把产物用全式金纯化试剂盒纯化之后就没有条带了，这是怎么回事啊？第一次失败怀疑是体系浓度太小，所以第二次p了两管平行，同时p的，条带都很正常，纯化依旧没有条带，这是为什么。
各位大神帮帮我。

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1楼2014-04-05 10:32:47

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-04-05 10:57:03
1、可能你过柱子的时候没把水加到正中间
2、你检测时的上样量太小，本来回收后浓度就很低的

1 是说往柱子里面加样的时候，要悬空滴在柱子中间？这个确实没有注意到…… 汗一个
2 上样量大概多少合适？我只上了三微升，是不是太少了？3微升是因为p好的产物孔里只加这么少

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5楼2014-04-05 12:32:32

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引用回帖:

4楼: Originally posted by d00614028 at 2014-04-05 11:16:12
从两个方面考虑吧：
1. 挂柱没挂上。
2. 洗脱没洗下。
洗脱的话看看洗脱液的PH值是否正确，看看说明书。
实在不行自己配置试剂来纯化把，3M CH3COONa，你在网上搜搜方法。

第一次求助，以为金币是由自己给呢，一不小心全给前面的了，对不住啊
谢谢你的帮助，我今天再试试

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9楼2014-04-05 14:56:41

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